隨州和安陸銀杏古樹(shù)種核變異的分子遺傳基礎(chǔ).pdf

1、銀杏(GinkgobilobaL.)屬銀杏科銀杏屬，為現(xiàn)存種子植物中最古老的孑遺植物之一，有“活化石”之稱(chēng)。我國(guó)作為世界銀杏的起源地，銀杏古樹(shù)資源十分豐富，湖北省的隨州和安陸是主要分布地之一。本研究在前人研究隨州和安陸銀杏古樹(shù)種核特征和種仁營(yíng)養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上(付慧敏，2006)，進(jìn)一步從分子水平對(duì)其變異狀況進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下： (1)用9條ISSR引物對(duì)120個(gè)銀杏單株種核胚乳的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共得到145條清

2、晰的擴(kuò)增譜帶。其中，多態(tài)性譜帶116條，多態(tài)位點(diǎn)百分率(PPB)為80.00％。在總體水平上，Nei’s基因多樣性HE為0.269，Shannon's多態(tài)性信息指數(shù)Ho為0.401，表明隨州和安陸銀杏種核在總體水平上具有較廣泛的遺傳變異。 (2)用多態(tài)位點(diǎn)百分率(PPB)、觀測(cè)等位基因數(shù)(Ao)、有效等位基因數(shù)(AE)、Nei’s基因多樣性值(HE)以及Shannon's多態(tài)性信息指數(shù)(Ho)來(lái)度量四種種核類(lèi)型內(nèi)的遺傳變異，結(jié)果

3、表明：不同種核類(lèi)型遺傳變異程度依次是梅核類(lèi)>馬鈴類(lèi)>圓子類(lèi)>佛指類(lèi)。四種種核類(lèi)型間的遺傳分化值GST為0.228，ФST=2.46％，說(shuō)明銀杏古樹(shù)的遺傳變異主要分布在類(lèi)型內(nèi)。 (3)根據(jù)單株間的遺傳相似系數(shù)(GS)，應(yīng)用UPGMA法構(gòu)建120個(gè)銀杏單株的分子聚類(lèi)圖；根據(jù)種核的形態(tài)特征應(yīng)用UPGMA法對(duì)120個(gè)銀杏單株進(jìn)行形態(tài)聚類(lèi)。兩種聚類(lèi)方法的相關(guān)分析表明形態(tài)標(biāo)記和ISSR標(biāo)記所揭示的銀杏古樹(shù)的遺傳關(guān)系未達(dá)顯著水平。 (

4、4)從9條ISSR引物中，挑選出擴(kuò)增譜帶較多的6條引物，對(duì)10株銀杏古樹(shù)共100粒種子的胚乳DNA進(jìn)行ISSR分析，揭示銀杏在個(gè)體水平上的遺傳變異豐富度。試驗(yàn)共擴(kuò)增出97條ISSR譜帶，單倍體水平和二倍體水平統(tǒng)計(jì)的多態(tài)性條帶分別為90條和39條，多態(tài)性條帶百分率分別為92.78％和40.21％。檢測(cè)出的平均雜合位點(diǎn)有55個(gè)，平均雜合率為56.91％，雜合率最高達(dá)到68.04％，最低也有45.36％，顯示出該地銀杏雜合水平都比較高。10株