番茄紅素對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肺纖維的干預(yù)作用及其機(jī)理初探.pdf

1、【目的】本課題在前期研究工作的基礎(chǔ)上，對(duì)番茄紅素的測(cè)定方法作出一定改進(jìn)，以建立測(cè)定番茄紅素油樹(shù)脂中番茄紅素含量的簡(jiǎn)便易行的方法。對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性肺纖維化進(jìn)行干預(yù)治療，以進(jìn)一步挖掘番茄紅素的潛在應(yīng)用價(jià)值；在得到較明確結(jié)果的基礎(chǔ)上，對(duì)其在免疫學(xué)、氧化/抗氧化機(jī)制方面的作用機(jī)理進(jìn)行初步研究；同時(shí)對(duì)提倡人們合理健康飲食預(yù)防肺纖維化，作出理論及實(shí)驗(yàn)方面的鋪墊和準(zhǔn)備。 【方法】采用本教研室研究的改良有機(jī)溶劑浸提法從市售新鮮番茄中提取番茄紅素，用

2、分光光度法和高效液相層析法進(jìn)行定性及定量分析；對(duì)番茄紅素定量測(cè)定分光光度法進(jìn)行改進(jìn)，以第三吸收峰525nm為測(cè)定波長(zhǎng)，消除β-胡蘿卜素等干擾物對(duì)測(cè)定的影響。 60只SD大鼠，雌雄不限，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(C組)、模型組(M組)和番茄紅素干預(yù)組(L組)，每組各20只。M組和L組采用抗腫瘤藥物博萊霉素經(jīng)氣管注射建立大鼠肺纖維化模型，造模當(dāng)日起L組每天用自提的番茄紅素灌胃，3、7、14和28d處死大鼠采集肺組織及血漿標(biāo)本，測(cè)定肺系數(shù)，

3、肺組織作常規(guī)固定后進(jìn)行HE和Masson染色，對(duì)肺泡炎及肺纖維化程度作出評(píng)價(jià)。 對(duì)肺組織切片進(jìn)行免疫組化染色，鏡下觀察模型組與番茄紅素干預(yù)組TNF-α及TGF-β1的表達(dá)情況；測(cè)定血漿TNF-α、NO、MDA含量及SOD活性。比較各組實(shí)驗(yàn)大鼠上述指標(biāo)的差異，對(duì)番茄紅素干預(yù)大鼠實(shí)驗(yàn)性肺纖維化的作用機(jī)理進(jìn)行初步探討。 【結(jié)果】共提取約165ml番茄紅素樣品，以高效液相層析法定量測(cè)定結(jié)果為準(zhǔn)，番茄紅素濃度約為1.8mg/ml，

4、即總共提取了約297mg番茄紅素。對(duì)番茄紅素測(cè)定方法進(jìn)行了一定程度的改進(jìn)，結(jié)果顯著低于485nm的測(cè)定值(P＜0.01)。 成功建立起大鼠實(shí)驗(yàn)性肺纖維化模型；與模型組相比，番茄紅素干預(yù)組肺系數(shù)降低(14、28d：P＜0.05)，肺泡炎及肺纖維化均有一定程度的減輕(前者3、7、14d，后者14、28d：P＜0.05)。 免疫組化結(jié)果方面，番茄紅素干預(yù)組肺組織TGF-β1和TNF-α的表達(dá)在3、7d低于模型組；番茄紅素干預(yù)組

5、各時(shí)間段血漿TNF-α、NO含量均低于模型組，7、14、28d干預(yù)組TNF-α含量顯著低于模型組(P＜0.01)，而NO含量則在14d顯著低于模型組(P＜0.05)；氧化/抗氧化指標(biāo)方面，番茄紅素干預(yù)組血漿MDA含量低于模型組，3d有顯著性差異(P＜0.05)，而血漿SOD活性高于模型組，28d有顯著性差異(P＜0.05)。 【結(jié)論】成功提取出番茄紅素，為下一步研究作好了準(zhǔn)備；對(duì)其定量測(cè)定方法進(jìn)行了一定程度的改進(jìn)。 番茄