斑蝥素對人白血病HL-60細(xì)胞株hTERT mRNA表達(dá)的影響及啟動(dòng)子甲基化作用初探.pdf

1、目的:研究斑蝥素對人白血病HL60細(xì)胞株端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA表達(dá)的影響及啟動(dòng)子甲基化的作用,以期闡明斑蝥素抗白血病的機(jī)制是否與其通過調(diào)控hTERT啟動(dòng)子甲基化水平來調(diào)節(jié)hTERT表達(dá)有關(guān)。方法:采用MTT法證實(shí)斑蝥素抑制HL60細(xì)胞株增殖的確切作用;倒置顯微鏡觀察藥物作用后的腫瘤細(xì)胞形態(tài)并攝片;采用RT-PCR半定量法檢測不同濃度斑蝥素對HL60細(xì)胞株端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT) mRNA的表達(dá)情況的影響;利用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)

2、(MSP)的方法,用亞硫酸氫鈉修飾后的DNA為模板進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),檢測不同濃度斑蝥素對HL60細(xì)胞株hTERT啟動(dòng)子甲基化作用情況。結(jié)果:斑蝥素可抑制HL60細(xì)胞增殖,具有明顯的時(shí)間和劑量效應(yīng);空白組與中劑量斑蝥素組之間、空白組與高劑量斑蝥素組之間以及中高劑量斑蝥素組之間hTERTmRNA的相對表達(dá)量比較均具有顯著差異性(P＜0.01);中劑量斑蝥素組、高劑量斑蝥素組均能降低hTERTmRNA的相對表達(dá)量(P＜0.01);高