中國(guó)水仙化學(xué)成分與生物活性研究.pdf

1、中國(guó)水仙(Narcissus tazetta var.chinensis Roem)又名雅蒜、鱗波仙子、天蔥、女星等，為石蒜科(Amaryllidaceae)水仙屬(Narcissus)多年生草本植物。始載于《本草會(huì)編》，主要分布在江蘇、浙江、福建、廣東、四川、貴州等地，喜濕潤(rùn)肥沃的砂質(zhì)壤土。水仙鱗莖味苦、微辛，性寒，有毒。歸心，肺經(jīng)。清熱解毒，散結(jié)消腫。主治癰疽腫毒，乳癰，瘰疬，痄腮，魚(yú)骨梗喉。石蒜科植物在很早以前就被用作藥用植物。在

2、公元前4世紀(jì)，就已經(jīng)有人應(yīng)用石蒜科植物治療早期腫瘤?，F(xiàn)代人們對(duì)石蒜科的生物堿成分進(jìn)行了廣泛的藥理活性研究，認(rèn)為其具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用、心血管系統(tǒng)作用、抗腫瘤作用、抗菌和抗病毒作用等。文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，雖然對(duì)石蒜科的許多種植物的化學(xué)成分研究比較深入，但是對(duì)中國(guó)水仙尚無(wú)系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，因此，我們選擇該植物對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)的分離和鑒定，并且進(jìn)行體外細(xì)胞毒活性篩選和抗氧化活性篩選，旨在發(fā)現(xiàn)具有良好抗腫瘤活性和抗氧化活性的化合物，為抗腫瘤藥物

3、和神經(jīng)保護(hù)作用藥物的研發(fā)及天然產(chǎn)物分析奠定基礎(chǔ)。
　　 本課題以采集于福建省漳州市的水仙鱗莖部位作為研究對(duì)象，采用硅膠柱，ODS，Sephadex LH-20，制備薄層，半制備HPLC等色譜技術(shù)和IR，UV，MS，1D、2D NMR等波譜方法從其醇提取物的各萃取部位中共分離鑒定了50個(gè)化合物，其中包括黃烷衍生物類(lèi)化合物4個(gè)、黃烷類(lèi)化合物10個(gè)、二氫黃酮類(lèi)化合物4個(gè)、木脂素類(lèi)化合物4個(gè)、生物堿類(lèi)11個(gè)，核苷類(lèi)化合物2個(gè)，簡(jiǎn)單取代苯

4、類(lèi)化合物8個(gè)，其他類(lèi)化合物7個(gè)。其中新化合物8個(gè)，具體化合物如下:
　　 1.(1S,5S,8S)-5-羥基-8-（4-羥基苯）-1-甲基雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2，9-二酮
　　 2.（1S,5S,8S)-5-羥基-8-（3-羥基-4-甲氧基苯）-1-甲基雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2，9-二酮
　　 3.(1R，5S,8R,9S)-5，9-二羥基-8-（4-羥基苯）雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2-酮

5、
　　 4.(1R,5S,8S,9S)-5，9-二羥基-8-（4-羥基苯）-1-甲基雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2-酮
　　 5.(2S)-7-羥基-3'，4'-二甲氧基黃烷
　　 6.8-甲基-7，3'，4'-三羥基黃烷
　　 7.(2S)-7，4'-二羥基黃烷
　　 8.(2S)-4'-羥基-7-甲氧基黃烷
　　 9.(2S)-8-甲基-7，4'-二羥基黃烷
　　 10.(2

6、S)-7，3'，4'-三羥基黃烷
　　 11.(2S)-3'，4'-二羥基-7-甲氧基黃烷
　　 12.(2S)-4'-羥基-7，3'-二甲氧基黃烷
　　 13.(2S)-7，3'，4'-三甲氧基黃烷
　　 14.(2S)-3'，7-二羥基-4'-甲氧基-8-甲基黃烷
　　 15.(2S)-4'-羥基-7'-甲氧基二氫黃酮
　　 16.(2S)-8-甲基-5，7，4'-三羥基二氫黃酮

7、>　　 17.杜鵑素
　　 18.貫眾亭
　　 19.(+)-落葉松脂醇
　　 20.㈩-松脂素
　　 21.(+)-（7S,8R，7'E)-4-羥基-3，5'-二甲氧基-4'，7-環(huán)氧-8，3'-neolign-7'-烯-9，9'-二醇-9'-乙醚
　　 22.榕醛
　　 23.多花水仙堿
　　 24.水鬼蕉種堿
　　 25.6a-去氧-8-氧多花水仙堿
　　

8、26.(+)-水仙環(huán)素
　　 27.7-脫氧水仙環(huán)素
　　 28.4-脫氧石蒜西定
　　 29.石蒜堿
　　 30.偽石蒜堿鹽酸鹽
　　 31.5，6-二氫雙色水仙堿
　　 32.ismine
　　 33.N-網(wǎng)球花定堿鹽酸鹽
　　 34.5'-O-甲基尿苷
　　 35.胸苷
　　 36.羥基酪醇
　　 37.3，5-二甲氧基-4-甲基苯酚
　

9、　 38.2，4-二羥基-6-甲氧基乙酰苯
　　 39.2，6-二羥基-3-甲基4-甲氧基乙酰苯
　　 40.2-羥基-3-甲基4，6-二甲氧基乙酰苯
　　 41.2，2'-二羥基-3-甲基-4，6-二甲氧基乙酰苯
　　 42.1-(2，4-二羥基-3-甲基-6-甲氧基苯基)-2-羥基乙酮
　　 43.1-(2-羥基-3-甲基-4，6-二甲氧基苯基)-2-甲氧基乙酮
　　 44.2-羥基

10、-4，6-二甲氧基-7-甲基-1-苯并呋喃-3(2H)-酮
　　 45.4-(1-乙氧基-2，3-二羥基丙烷)-1，2-二羥基苯
　　 46.monomethylsulochrin
　　 47.2'，4，4'-三羥基-3'-甲基查爾酮
　　 48.8-羥基-3-(2-羥基丁烷)-6-甲氧基香豆素
　　 49.12-羥基-2-十三烷酮
　　 50.2，11-十三烷二酮
　　 其中化合

11、物1-6，44，45為8個(gè)新化合物。首次從該植物中分離到的化合物29個(gè)，分別為7-22，24，25，27，28，31-36，46-48。并且化合物1-2屬于罕見(jiàn)的具有雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2，9-酮母核的化合物，到目前為止只有一個(gè)類(lèi)似的天然產(chǎn)物被報(bào)道，這個(gè)化合物是從巴西藥用植物Brosimum acutififolium中分離得到的。而化合物3-4屬于罕見(jiàn)的具有9-羥基-雙環(huán)[3.3.1]壬-3-烯-2-酮母核的化合物，到目前為

12、止還沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道有類(lèi)似天然產(chǎn)物。
　　 采用MTT法測(cè)試了分離得到的部分化合物對(duì)5種人腫瘤細(xì)胞株[A549（人肺腺癌細(xì)胞）、HCT116（人結(jié)腸癌細(xì)胞）、SK-BR-3（人乳腺癌細(xì)胞）、MDA-MD-231（人乳腺癌細(xì)胞）、HepG2（人肝癌細(xì)胞）]的體外細(xì)胞毒活性，結(jié)果顯示生物堿類(lèi)化合物26，27，30，31，33對(duì)4個(gè)細(xì)胞株(A549，HCT116，MDA-MB-231，HepG2)均有很強(qiáng)的細(xì)胞增殖抑制作用(IC50＜10

13、μg/mL)，生物堿類(lèi)化合物29對(duì)3個(gè)細(xì)胞株(HCT116，MDA-MB-231，HepG2)均有很強(qiáng)的細(xì)胞增殖抑制作用(IC50＜3μg/mL)，而其他的生物堿類(lèi)化合物則沒(méi)有明顯的抑制作用。黃烷類(lèi)化合物8，9，12對(duì)4個(gè)細(xì)胞株(A549，HCT116，SK-BR-3，HepG2)也有弱的細(xì)胞增殖抑制作用，而其他的黃烷類(lèi)化合物沒(méi)有表現(xiàn)出抑制作用。研究表明:中國(guó)水仙中起到抗腫瘤作用的主要是生物堿類(lèi)成分。
　　 采用CCK-8法測(cè)試

14、了分離得到的部分化合物對(duì)H2O2誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，結(jié)果350μmol/L H2O2誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞12 h，細(xì)胞活力下降(P＜0.01)，細(xì)胞存活率為46.23％，結(jié)果顯示凋亡組OD值(0.557±0.045)明顯低于正常組(1.206±0.021)(P＜0.01)。加入黃烷類(lèi)化合物7，8，11，12，14，二氫黃酮類(lèi)化合物15，以及木脂素化合物19的化合物組OD值上升，說(shuō)明能顯著抑制H2O2對(duì)入神經(jīng)母細(xì)