白腐真菌生物降解油菜秸稈及飼料化研究.pdf

1、本研究選擇以產(chǎn)漆酶為主的野生菌糙皮側(cè)耳為研究材料,利用常規(guī)的紫外線照射技術(shù)對(duì)其進(jìn)行改良育種,篩選出一株高產(chǎn)菌株 ADW-08,然后對(duì)其固體發(fā)酵培養(yǎng)基、最佳發(fā)酵條件進(jìn)行了初步優(yōu)化,并對(duì)ADW-08木質(zhì)素降解酶系組成及其對(duì)油菜秸稈生物降解效果進(jìn)行了研究,同時(shí)對(duì)油菜秸稈飼料化應(yīng)用作了有益探索。 ⑴對(duì)菌糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatusWY-01)進(jìn)行紫外線照射,結(jié)果表明：當(dāng)照射時(shí)間為50s時(shí),其孢子致死率在70％～80％

2、之間,而此時(shí)突變率達(dá)到最大,因此確定50s為最佳照射時(shí)間。突變高產(chǎn)菌株ADW-08的漆酶活性由出發(fā)菌株P(guān)leurotus ostreatusWY-01的最高酶活力從2.78 U/g提高到7.78U/g。突變菌株ADW-08經(jīng)傳5代培養(yǎng),產(chǎn)酶性能穩(wěn)定。 ⑵采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)ADW-08產(chǎn)漆酶固體培養(yǎng)基進(jìn)行初步研究,確定其最適培養(yǎng)基組成：葡萄糖15g/L,酒石酸銨0.4g/L,硫酸錳0.25g/L。在優(yōu)化后的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上確定

3、其產(chǎn)漆酶最適發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度為28℃、培養(yǎng)基起始pH為5.0、接種量為每20g油菜秸稈3個(gè)菌塞(φ12cm)時(shí)漆酶分泌量最大。ABTS(1mmol/L)和藜蘆醇(1mmol/L)對(duì)漆酶的分泌均有不同程度的誘導(dǎo)作用,而吐溫-80(1％)對(duì)產(chǎn)漆酶有一定的抑制作用。 ⑶高產(chǎn)菌株ADW-08的木質(zhì)素降解率最佳固體配方組成：葡萄糖15g/L,酒石酸銨0.4g/L,硫酸錳0.75g/L。 ⑷對(duì)高產(chǎn)菌株ADW-08木質(zhì)素降解酶系組

4、成和生物降解油菜秸稈效果研究表明：高產(chǎn)菌株ADW-08木質(zhì)素降解酶酶系為L(zhǎng)accase-MnP型,其最高酶活分別出現(xiàn)在第24天6.67U/g和2.67U/g;發(fā)酵60天時(shí),油菜秸稈中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素降解率分別為56.28％、40.80％和45.22％,粗蛋白、必需氨基酸和總氨基酸分別提高43.73％、135.16％和101.51％,且氨基酸含量齊全。 ⑸油菜菌糠作為飼料部分替代奶牛日糧進(jìn)行飼喂試驗(yàn)結(jié)果表明：替代50％苜蓿