人臍血細胞和胚胎骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療新生大鼠缺氧缺血性腦病的實驗研究.pdf

1、中山大學博士學位論文人臍血細胞和胚胎骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療新生大鼠缺氧缺血性腦病的實驗研究姓名：朱美玲申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：李樹濃20040425立垡墨豎主燕羔三一塵壁蘭塑矍登璧塑量墼蹩童蓬王塑堅塋壁塑堡塹蘭莖墼氅整璧壘堡壁堡箜塞墼墅窒hFBM／vlSCs)是否具備治療HIE的生物學特穗采用hFBMMSCs移植能否有效改善HIE所致的功能缺陷這些就是本研究的主要目的。必戇，器震以下4都傍研究：鐮一部徐：I

2、tlICBC熬本生物學特整磷究I1臍血多項指標測定前兩已述，臍血HSPC可以分化為神經(jīng)細胞，那么HSPC含量與臍血神經(jīng)細胞分化潛能正稿關。為此，在本研究的第一部份酋先隨機統(tǒng)計分孛斥24份新生兒蘩蠹缽襁、惑騫棱鰓施霪otalNuclearCells，TNC)、蔻摹孩纓戇(TotalMononuelearCells，TMNC)、總集落形成單位(TotalColonyformingCellsTCFC)、TCD34(TotalCD34Cells

3、)以及MNC／NC等6項反映臍血HSPC含量參數(shù)。臍血平均體積達93ml：TNC、TMNC、TCFCs、TCD34分別為(i75077)x109、(i070。18x109、(O。57043xl薩、(50。t327。93)105；MNC／NC兔1。82108。結果表明新鮮臍盤富含HSPC，聯(lián)涿蕾臍矗具備強大翡孝棗經(jīng)細魏分純潛能。12HUCBC分離、凍存方法的研究為r便于隨時為臨床掇鏃HUCBC，脊必鼴對緞胞進章亍凍存；患予新鮮臍血搴積大，

4、蕾先須對弼e魏C避季亍分離，霧豫多眾矗漿毒霪盔綞纛，爨越，分離技本對保障分離后HUCBC數(shù)撼非常重要。在本課題中通過反復實驗擻索，建立了～種改良羥乙基淀粉(hydroxyethylstarch，ttES)分離方法，經(jīng)該方法分離后，臍血中TNC、TMNC及TCD34細胞獲得率分別離達(90o士32)％、(89啦28)％、(90，0e32)％，鴦效簿懲rHUCBC魏丟失。迄綏憨凍存方囂，絮耀Dextran40和=甲蒸亞砜(DimethylS

5、ulfoxide，DMSO)作為深祗濕凍存保護裁，經(jīng)BioArchive“3626全自勘凍存系統(tǒng)程序降溫盾貯存于一196“C液綴環(huán)境，能有效保存IUcBc生物學特性，阻不受凍存時間影響。顯示所建立的分離、凍存技術能保障灝奪貯的HUCBC數(shù)爨釃蔟量滿足臨床要求。13俸耱誘導HUCBC分純努簿經(jīng)群綴貔研究采用含丹參的誘導墻莽體系，體外誘導HUCBC向神經(jīng)樣細胞分化。結果：貼壁生長的HUCBC伸出長長的突起，并在突起米端出現(xiàn)一級和二級分支，類