姜黃素加大豆低聚糖治療潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在觀察姜黃素加大豆低聚糖對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的治療作用。探討細(xì)胞因子(IL-1β、IL-4、IL-6)和核因子-ΚBp65(NF-ΚBp65)在UC發(fā)病中的可能作用機(jī)制。
　　方法:選取雄性SD大鼠80只，隨機(jī)分成4組，每組20只，分別為:正常組、柳氮磺胺吡啶(SASP)組、模型組、姜黃素加大豆低聚糖(Cur plus SBOS)組。除正常組外，其余3組動(dòng)物分別用2，4二硝基氯苯(DNCB)灌腸和滴背處理建立大鼠潰

2、瘍性結(jié)腸炎模型。處理后每天觀察，以大鼠一般情況差和出現(xiàn)膿血便作為造模成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)，造模成功后，收集大便一次，檢測(cè)大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌含量。并給予治療處理:SASP組給予SASP溶液100mg/kg（即每千克體重給藥100mg）灌胃，每日一次;姜黃素加大豆低聚糖組給予姜黃素100mg/kg，大豆低聚糖3.33ml/kg灌胃，每日一次;正常組和模型組僅給予1％羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，每日一次。所有動(dòng)物均給予灌胃治療4周，完

3、畢收集糞便一次，檢測(cè)大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌含量。第5周斷頭處死全部大鼠并收集血液4ml，離心收集血清樣本待測(cè);同時(shí)解剖結(jié)腸組織，肉眼觀察結(jié)腸粘膜大體形態(tài)損傷并計(jì)算得分，剪取病變最明顯處結(jié)腸組織制作石蠟塊。采用雙抗體夾心ABC-ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法）檢測(cè)血清白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)，白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-4(IL-4)的含量;結(jié)腸組織蠟塊行病理切片后部分進(jìn)行蘇木精-伊紅(HE)染色并拍照，

4、計(jì)算結(jié)腸粘膜組織學(xué)損傷得分;部分進(jìn)行免疫組化(IHC)檢測(cè)結(jié)腸粘膜NF-κ B p65的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:治療前，UC模型組大鼠結(jié)腸粘膜大體形態(tài)和組織學(xué)損傷評(píng)分以及血清IL-1β，IL-6水平最高，血清IL-4水平和結(jié)腸粘膜NF-κ Bp65灰度值最低;大鼠糞便菌群中大腸桿菌、腸球菌含量最高，雙歧桿菌、乳酸桿菌含量最低。治療后，與模型組比較，姜黃素加大豆低聚糖組大鼠結(jié)腸粘膜大體形態(tài)和組織學(xué)損傷評(píng)分及血清IL-1β，IL-6水平

5、顯著降低(P＜0.01);血清IL-4水平和結(jié)腸粘膜NF-κ Bp65灰度值顯著升高（P＜0.01），與SASP組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;該組大鼠糞便菌群中大腸桿菌、腸球菌含量較模型組、SASP組及治療前均降低(P＜0.05)，而雙歧桿菌、乳酸桿菌明顯增多，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:姜黃素加大豆低聚糖能促進(jìn)潰瘍性結(jié)腸炎的愈合。其可能的作用機(jī)制是Cur的抗炎作用，它能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的釋放，通過抑制NF

6、-Κ B激活途徑中的關(guān)鍵酶、抑制部分NF-Κ B活化的信號(hào)（主要為細(xì)胞因子）以及上調(diào)結(jié)腸組織中PPAR-γ的表達(dá)而負(fù)性調(diào)節(jié)NF-Κ B表達(dá)等來(lái)阻斷NF-Κ B信號(hào)通路，從而阻斷炎癥的放大效應(yīng)而達(dá)到顯著的抗炎效果，減輕結(jié)腸粘膜炎癥反應(yīng)和組織的損傷，對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎起保護(hù)作用。SBOS能促進(jìn)腸道有益菌的增殖特別是雙歧桿菌，減少致病菌的生長(zhǎng);同時(shí)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞因子維持腸道粘膜屏障、上皮的完整性以及增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性從而緩解結(jié)腸粘膜的炎癥反應(yīng)，促使