乙醇在大鼠體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)及其對(duì)大鼠行為學(xué)影響的相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、背景與目的:
　　近年來(lái),隨著人民生活水平的提高,乙醇的飲用也越來(lái)越多,由此而引發(fā)的各種民事和刑事案件以及交通事故也呈上升趨勢(shì)。國(guó)內(nèi)外已有多項(xiàng)慢性乙醇中毒的相關(guān)研究報(bào)道,但對(duì)于急性乙醇中毒所致行為學(xué)改變及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究較少。急性飲酒后,對(duì)人體的各個(gè)大系統(tǒng)如血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等均有不同程度的影響,乙醇在體內(nèi)的代謝也受種族、性別、飲酒量等多種因素的影響。眾所周知,乙醇達(dá)到一定的濃度后會(huì)影響人對(duì)自身行為的控制能力,但對(duì)

2、于飲用多少灑精可對(duì)駕駛行為構(gòu)成危害方面,目前的研究結(jié)論仍存在矛盾;我國(guó)在有關(guān)交通法規(guī)中規(guī)定了酒后駕車(chē)和醉酒駕車(chē)的標(biāo)準(zhǔn)和處罰辦法,由于人體乙醇代謝的作用,可能在發(fā)生事故時(shí)人體乙醇含量是達(dá)到酒后駕車(chē)標(biāo)準(zhǔn)的,但檢測(cè)時(shí)可能達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn),使駕車(chē)者逃避懲罰。因此,進(jìn)一步研究乙醇對(duì)行為學(xué)的影響及其作用機(jī)制,了解行為學(xué)的改變與乙醇在體內(nèi)代謝的關(guān)系,具有較高的實(shí)踐意義及臨床意義。
　　方法:
　　1.分別按4ml/kg、8ml/kg、16ml/

3、kg的乙醇體重比對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃,制作低、中、高劑量急性乙醇中毒模型,對(duì)照組給予相應(yīng)體積的生理鹽水。
　　2.通過(guò)電Y迷宮觀察大鼠在不同濃度乙醇及時(shí)間作用下行為學(xué)的改變。
　　3.采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)不同劑量乙醇作用下大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞中c-fos、c-jun的表達(dá)。
　　4.采用氣相色譜對(duì)大鼠進(jìn)行乙醇濃度檢測(cè),根據(jù)乙醇在大鼠體內(nèi)的代謝推算出房室模型及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0軟件包進(jìn)

4、行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s)表示,符合正態(tài)分布和方差齊時(shí)組間比較采用單因素方差分析、LDS~t檢驗(yàn),非正態(tài)分布和方差不齊時(shí)采用非參數(shù)檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠行為學(xué)的改變:灌胃后0h各個(gè)組別大鼠逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)均在正常范圍,組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);灌胃后0.5h、1h、2h、4h、8h、12h大鼠逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)

5、有不同程度的變化,組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);灌胃后24h各組大鼠逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)基本恢復(fù)正常,組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。隨著時(shí)間的變化,各組大鼠逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)呈現(xiàn)一定的規(guī)律性,4ml/kg組在灌胃2h逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)最多,8ml/kg組、16ml/kg組在在灌胃后4h逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)最多,隨著時(shí)間的增加,4ml/kg組、8ml/kg組、16ml/kg組分別在灌胃8h、12h、24h基本恢

6、復(fù)正常。
　　2.大鼠腦組織HE染色變化:對(duì)照組、低劑量組各時(shí)間點(diǎn)腦組織病理變化不明顯;中劑量組4h、8h變化較明顯,可見(jiàn)腦實(shí)質(zhì)內(nèi)血管擴(kuò)張、充血,神經(jīng)細(xì)胞周?chē)靶⊙苤車(chē)幌对鰧?高劑量組變化最明顯,2h、4h、8h時(shí)見(jiàn)腦實(shí)質(zhì)內(nèi)血管擴(kuò)張、充血,神經(jīng)細(xì)胞周?chē)靶⊙苤車(chē)幌对鰧捗黠@,胞漿淡染,個(gè)別區(qū)域內(nèi)有散在的紅細(xì)胞。
　　3.c-fos、c-jun在大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞的表達(dá):免疫組化陰性對(duì)照組可見(jiàn)細(xì)胞核呈淡藍(lán)色;陽(yáng)性反應(yīng)主要位于

7、細(xì)胞核內(nèi)。用陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)法反映陽(yáng)性反應(yīng)的強(qiáng)度,表達(dá)情況不盡相同。隨著時(shí)間的變化,c-fos、c-jun呈現(xiàn)一定的規(guī)律,大鼠乙醇灌胃2h后各組別均有c-fos、c-jun的表達(dá),4h時(shí)中、高劑量組c-fos、c-jun表達(dá)較強(qiáng),胞核染色較深,與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、低劑量組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),至8h表達(dá)有所下降,低劑量組恢復(fù)至實(shí)驗(yàn)對(duì)照組水平,24h時(shí)中劑量組c-fos、c-jun表達(dá)也恢復(fù)至對(duì)照組水平。
　　4.大鼠藥代動(dòng)力學(xué)

8、方法學(xué)考察:血液中雜質(zhì)不干擾乙醇的檢測(cè),本方法專(zhuān)屬性、重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、分離度良好,符合生物樣品的測(cè)定要求,可用于測(cè)定大鼠血漿中乙醇的含量。
　　5.不同劑量組藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的差異:和藥物吸收分布有關(guān)的參數(shù)Cmax、V、AUC各組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),對(duì)劑量依賴(lài)型參數(shù)Cmax、AUC和給藥劑量間相關(guān)性進(jìn)行檢驗(yàn),結(jié)果給藥劑量和Cmax、AUC呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.512(P<0.01)、0.688(P<0.01

9、),各參數(shù)均隨給藥劑量的增加而增大,與給藥劑量間存在明顯的正相關(guān)關(guān)系。和藥物消除有關(guān)的速率常數(shù),Ke,T1/2ke各組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),CL各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.急性乙醇中毒可引起大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙,其程度與乙醇濃度有關(guān),同時(shí)與作用時(shí)間也有密切關(guān)系;相同乙醇濃度灌胃后,大鼠逃避電擊反射的出錯(cuò)次數(shù)在不同的時(shí)間也有差異。
　　2.乙醇可誘導(dǎo)腦神經(jīng)細(xì)胞中c-fos、