枇杷花藥愈傷組織誘導(dǎo)及褐化機(jī)理和控制方法研究.pdf

1、本研究以枇杷品系‘6-6-6’花藥作為組織培養(yǎng)的外植體，通過誘導(dǎo)枇杷花藥愈傷組織，進(jìn)一步測定花藥愈傷組織繼代培養(yǎng)過程中總酚含量和與褐化相關(guān)酶活性的變化。初步探究了枇杷花藥愈傷組織褐化的機(jī)理，找到控制花藥愈傷組織褐化的有效措施。主要研究結(jié)果如下:
　　1、枇杷花蕾的橫徑、縱徑與小孢子發(fā)育時(shí)期呈顯著正相關(guān)。當(dāng)花蕾橫徑為4.68mm，縱徑為4.96mm，花藥顏色為黃綠色時(shí)，小孢子的發(fā)育時(shí)期處于單核靠邊期，最適于枇杷花藥愈傷組織誘導(dǎo)。

2、r>　　2、最佳低溫預(yù)處理時(shí)間篩選:經(jīng)過4℃低溫預(yù)處理1d的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)71.11％，此條件處理下，誘導(dǎo)率最高且愈傷組織狀態(tài)良好。但隨著低溫預(yù)處理時(shí)間不斷延長，愈傷組織誘導(dǎo)率逐漸降低。
　　3、最佳蔗糖濃度篩選:培養(yǎng)基中添加蔗糖濃度為5％時(shí)，誘導(dǎo)愈傷組織的效果最佳，愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)75.93％。當(dāng)濃度超過5％，隨著蔗糖濃度的增加愈傷組織誘導(dǎo)率逐漸下降。
　　4、枇杷花藥愈傷組織培養(yǎng)過程中，總酚含量與愈傷組織褐化程度呈

3、正相關(guān);PPO活性變化與愈傷組織褐化程度呈正相關(guān);未褐化愈傷組織POD活性與褐化愈傷組織變化趨勢相反，與褐化程度無明顯相關(guān)性;SOD活性變化與愈傷組織褐化程度呈負(fù)相關(guān)。
　　5、不同pH值、蔗糖、瓊脂濃度處理中，pH5.4、蔗糖40g/L、瓊脂7.5g/L時(shí)愈傷組織褐化指數(shù)最低。不同處理下，總酚含量和PPO活性與褐化指數(shù)呈正相關(guān)，POD和SOD活性則無明顯相關(guān)。
　　6、不同基本培養(yǎng)基、NAA、6-BA濃度處理中，當(dāng)基本培養(yǎng)

4、基為MS、NAA為1.0mg/L、6-BA0.25mg/L時(shí)，愈傷組織褐化指數(shù)最低，為28.92％。在不同處理?xiàng)l件下，愈傷組織總酚含量、PPO活性與其褐化指數(shù)呈正相關(guān)，POD活性與褐化指數(shù)不相關(guān)， SOD活性則與愈傷組織褐化指數(shù)呈負(fù)相關(guān)。
　　7、AgNO3濃度為6mg/L時(shí)愈傷組織褐化指數(shù)最低。AgNO3各處理愈傷組織褐化指數(shù)與總酚含量、PPO活性呈正相關(guān)，與POD活性不相關(guān)，與SOD活性負(fù)相關(guān)。
　　8、抗氧化劑處理中，