薯莨有效成分的提取分離及其對(duì)心臟收縮和內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:從中草藥薯莨中提取分離具有心血管作用的成分,尋找有心血管活性的先導(dǎo)化合物.觀察其對(duì)離體心臟的作用和對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響,為開發(fā)該中草藥新的藥理作用做初步研究;闡明薯茛作用的內(nèi)涵,使它在理論源頭有所創(chuàng)新.方法:用正相硅膠柱、反相硅膠柱、葡聚糖凝膠柱及吸附樹脂柱層析方法分離純化有效成分,用硅膠G板和ODS板層析檢測(cè).測(cè)定化合物的紅外光譜、紫外光譜、質(zhì)譜以及核磁共振譜以鑒定結(jié)構(gòu).用Langendorff離體心臟觀察提取物對(duì)心

2、臟的作用;用ECV304細(xì)胞觀察化合物對(duì)H<,2>O<,2>誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響.體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304按如下分組處理:(1)正常對(duì)照組;(2)H<,2>O<,2>損傷組;(3)藥物組(化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ);(4)溶媒對(duì)照組;(5)陽性藥物對(duì)照組(Genistein).用H<,2>O<,2>分別孵育內(nèi)皮細(xì)胞4h和24h以損傷內(nèi)皮細(xì)胞,MTT法檢測(cè)各化合物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性的保護(hù)作用.AO染色、流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定各化合