富硒毛頭鬼傘菌絲深層發(fā)酵培養(yǎng)及其降血糖活性研究.pdf

1、本文研究富硒毛頭鬼傘菌絲深層發(fā)酵培養(yǎng)工藝，并對(duì)其發(fā)酵產(chǎn)品在降血糖方面的功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 (1) 通過正交試驗(yàn)，從四株毛頭鬼傘菌株中篩選出一株具有較高生物量和較強(qiáng)富硒能力的毛頭鬼傘菌株CcⅢ，并探討其耐硒和富硒特性。結(jié)果表明，CcⅢ菌株具有一定的耐硒能力和較強(qiáng)的富硒能力，其固體培養(yǎng)最大耐硒濃度為10 μg/mL，液體培養(yǎng)最大耐硒濃度為4 μg/mL。在硒濃度2 μg/mL 時(shí)，菌絲生物量為4.11 g/L，富硒率為50.57％

2、，有機(jī)化程度高達(dá)92.95％。
　　 (2) 研究營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)毛頭鬼傘菌絲生長(zhǎng)和富硒的影響，篩選到適合其毛頭鬼傘富硒深層發(fā)酵的優(yōu)化培養(yǎng)基配方：葡萄糖2％，玉米粉4％，花生粕0.4％，KH2PO4 0.2％，MgSO4·7H2O 0.1％，VB1 10×10-3 g/L，Na2SeO3 4.4×10-3 g/L，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行5 d的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)，菌絲生物量為：18.14 g/L，富硒率為：56.35 ％。
　　 (3) 采

3、用Plackett-Burman 法、最陡爬坡實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)(Box-Behnken)相結(jié)合的方法對(duì)毛頭鬼傘深層發(fā)酵富硒的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果表明，發(fā)酵條件中的種齡、裝液量、初始pH 值是主要影響因素。優(yōu)化后的發(fā)酵條件為：溫度25 ℃、轉(zhuǎn)速100 r/min、裝液量70 mL /250 mL、種齡133 h、接種量3％、初始pH 值5.8、發(fā)酵周期5 d。在此條件下，菌絲生物量為24.51 g/L，富硒率為81.03％，較優(yōu)化前分別

4、提高35.12％和43.80％。
　　 (4) 探討富硒毛頭鬼傘菌絲及硒多糖對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病小鼠降血糖功效的影響。
　　 建立糖尿病小鼠模型后，經(jīng)過3 w飼喂含10％富硒毛頭鬼傘菌絲飼料的糖尿病小鼠，體重明顯恢復(fù)(p<0.05)；血糖濃度明顯降低(p<0.05)；血清和組織中MDA含量顯著下降(p<0.05)；
　　 血清和組織中SOD和GSH-Px活性明顯增加(p<0.05)。經(jīng)過20 d腹腔注射毛頭鬼傘菌

5、絲硒多糖(150 mg/kg bw，硒含量：15.21 μg/g)的糖尿病小鼠，血糖濃度明顯降低(p<0.05)；血清TC、TG和LDL含量均明顯降低(p<0.05)，血清HDL含量明顯升高(p<0.05)；肝臟和腎臟組織中MDA含量明顯降低(p<0.05)，抗氧化酶(SOD、GSH-Px和CAT)活性明顯增強(qiáng)(p<0.05)，非酶抗氧劑(GSH、VC 和VE)濃度明顯增加(p<0.05)。由此推斷，富硒毛頭鬼傘菌絲及硒多糖顯著的降血糖