呼吸道病毒感染的多重RT-PCR-EHA快速鑒別診斷方法的研究.pdf

1、該項目所建立的呼吸道病毒快速診斷方法,將多重RT-PCR和酶聯(lián)分子雜交(EHA)技術相結合,通過一次實驗快速、特異地檢測臨床標本中呼吸道合胞病毒A和B、流感病毒A和B、副流感病毒1、2、3型7種病毒的RNA.實驗所用引物和探針是根據(jù)每種病毒的高度保守序列設計的,用6對半引物對臨床標本進行擴增.該研究通過插入病毒保守序列片段的重組質粒的體外轉錄的RNA作為陽性對照.該研究所建立的檢測方法將RT-PCR技術與分子雜交技術相結合,整個實驗可以

2、在8-10小時完成,該方法大大提高了檢測的敏感性,并且微孔板核酸雜交有利于實驗檢測高通量化,使該檢測方法除適用于日常臨床檢測外,還可用于大規(guī)模人群流行病調查.用RT-PCR-EHA方法對收集的兒科呼吸道感染的74個臨床標本進行檢測,并將檢測結果與病毒分離、紅細胞凝集試驗、細胞中的試驗和間接免疫熒光方法相比較.RT-PCR-EHA方法測出47個感染流感病毒A的陽性樣本,其余27個樣本對這七種病毒呈陰性反應;我們對47個流感A型陽性樣本用病