實驗性鉛性腎病腎臟纖維化發(fā)病機理及其防治的研究.pdf

1、第一章鉛對大鼠腎臟纖維化相關因子表達的影響研究背景：鉛是一種常見的工業(yè)毒物和環(huán)境污染物，鉛性腎病為中毒職業(yè)人群死亡原因的第二位。研究資料顯示鉛性腎病患者中幾乎都有腎臟纖維化的改變。鉛性腎病早期可完全治愈，而一旦出現(xiàn)腎小球硬化、腎間質纖維化甚至腎功能衰竭，病變將不可逆轉。但到目前為止鉛性腎病的機理尚不清楚，我國對本病的基礎研究報道較少，國外研究主要集中于探討鉛親合蛋白及核包涵體與腎損害的關系，對鉛導致腎臟纖維化的分子機理，國內(nèi)外目前尚無

2、相關報道。 目的：從蛋白質和分子水平觀察鉛對大鼠腎臟纖維化相關因子核因子-κB(NF-κB)、轉化生長因子-β(TGF-β)、干擾素-γ(IFN-γ)及纖維連接蛋白(FN)表達的影響。 方法：SD大鼠48只適應性飼養(yǎng)1周，采用隨機原則將動物分為6組，每組8只，Ac、Bc、Cc組為正常對照組，分別予蒸餾水喂飲1月、2月、3月；A、B、C為染鉛組，分別給O.5％的醋酸鉛喂飲1月、2月、3月。實驗結束時稱腎重、體重的變化；

3、原子吸收光譜石墨爐法測量血鉛、腎鉛的含量；電子顯微鏡觀察腎臟的超微病理改變；應用免疫組化的方法檢測腎組織NF-κB、TGF-β及FN蛋白的表達情況；用RT-PCR的方法檢測腎組織中NF-KB、TGF-B及FN mRNA的表達；用ELISA的方法檢測血清IFN-γ的含量。 結論: 1.鉛能促進FN蛋白和mRNA在腎組織中的表達。提示染鉛2月后腎組織即啟動了纖維化的早期環(huán)節(jié)。 2.鉛能促進NF-κB蛋白和mRNA在腎

4、組織中的表達,而NF-κB可促進腎臟纖維化,提示鉛所導致的腎臟纖維化與NF-KB有關。 3.鉛能促進TGF-βmRNA在腎組織中的表達,提示TGF-β也參與了鉛性腎病腎臟纖維化的發(fā)病過程,但鉛對該因子為一遲發(fā)性影 響。 4.鉛可降低血清IFN-γ含量。而IFN-γ對腎臟纖維化有保護作用,提示鉛所導致的腎臟纖維化與IFN-γ的降低有關。 第二章硫胺素和碘化鉀對實驗性鉛性腎病的治療作用及對纖維化相關因子表達的影響

5、 研究背景：目前對于鉛中毒的治療主要是驅鉛治療。常見的驅鉛藥物是螯合劑，但使用螯和劑有許多副作用。首先，它可導致超敏反應、白細胞減少、微量元素的丟失及腎功能衰竭等；其次，螯和劑僅供靜脈注射，且有局部刺激和產(chǎn)生過敏等不良反應，需脫產(chǎn)定時注射，不便作預防性用藥；第三，大部分藥物不能進入細胞內(nèi)，導致細胞內(nèi)的排鉛特別是軟組織中的鉛排出困難，近年對鉛作用的分子機制提示，鉛的毒性作用的靶位點在細胞分子上，如從分子水平給予藥物治療，預期可達到治

6、本和長期防治的良好效果。 目的：首先觀察硫胺素和碘化鉀對鉛性腎病的治療作用，進而從蛋白質和分子水平觀察他們對纖維化相關因子核因子-κB(NF-κB)、轉化生長因子．B(TGF-β)、干擾素-Y(IFN-γ)及纖維連接蛋白(FN)表達的影響。 方法：SD大鼠96只適應性飼養(yǎng)1周，隨機分為12組， 每組8只，Ac、Bc、Cc組為正常對照組，分別予蒸餾水喂飲1月、2月、3月；A<,pb.、B<,pb>、C<,pb>為染鉛組，

7、分別給予O.5％的醋酸鉛喂飲1月、2月、3月；A<,vb>、B、C<,vb>為硫胺素組，在給予O.5％的醋酸鉛喂飲的同時予硫胺素3mg／100g體重，注射用水稀釋灌胃qd，時間分別為1月、2月、3月；A<,KI>、B<,KI>、C<,KI>為碘化鉀組，在給予O.5％的醋酸鉛喂飲的同時予碘化鉀3mg／100g體重，注射用水稀釋灌胃qd，時間分別為1月、2月、3月。實驗結束時稱腎重、體重變化；原子吸收光譜石墨爐法測量血鉛、腎鉛含量；

8、電子顯微鏡觀察腎臟超微病理改變；用免疫組化的方法檢測腎組織NF-к B、TGF-β及FN蛋白的表達，用RT-PCR的方法檢測腎組織NF-к B、TGF-β及FN mRNA的表達，用ELISA的方法檢測血清IFN-γ含量。 結論： 1.硫胺素和碘化鉀能拮抗鉛對大鼠生長發(fā)育的影響，并有驅鉛、改善鉛性腎病超微結構的作用，兩者效果相當； 2．硫胺素和碘化鉀治療均可延緩鉛所導致的腎臟纖維化的早期啟動，且