胰島對妊娠的適應和催乳激素的作用.pdf

1、研究背景與目的:在1型糖尿病生產(chǎn)胰島素的胰腺β細胞被自身免疫攻擊所破壞。而在導致2型糖尿病的肥胖，β細胞量(mass)在糖尿病前期首先增加，以代償胰島素抵抗，隨后，β細胞量和功能逐漸喪失，這預示著高血糖的發(fā)生。由于β細胞的喪失在兩種主要類型的糖尿病中都起著重要作用，因此如何促進胰島增殖和胰島分泌功能越來越引起研究者的興趣，已成為糖尿病治療研究的焦點。在特定的生理狀態(tài)下，例如妊娠和肥胖，胰腺胰島β細胞量適應性增加，但其相關的信號通路尚未清

2、楚。妊娠中晚期SD大鼠的胰島量增加，分泌功能增強，同時血清催乳激素水平增高。研究其功能增強的機制，勢必為糖尿病的治療提供一條嶄新的思路。 材料與方法:1） 建立妊娠大鼠模型，進行腹腔注射的葡萄糖耐量試驗（IPGTT），空腹心臟采血，測定血脂水平，放射免疫學方法測定胰島素和胰高糖素的濃度。通過原位灌注胰島分離的方法，測定單個胰島的DNA和蛋白質(zhì)含量，對大鼠胰島的大小形態(tài)，胰島素和胰高糖素分泌功能進行研究，對其胰島素敏感性指數(shù)進行分

3、析； 2）利用熒光實時定量 PCR技術觀察妊娠大鼠胰島分泌功能增強是否通過JAK2/STAT5通路；用胰酶消化胰島，形成單個細胞，利用全細胞膜片鉗記錄β細胞膜Kv電流，通過測定Fura-2/AM孵育的細胞的熒光強度來測定[Ca2+]I。利用Western Blot 技術檢測妊娠大鼠胰島主要胞吐蛋白突觸融合蛋白（syntaxin-1）、囊泡相關膜蛋白（VAMP-2）和突觸小體相關蛋白（SNAP-25）的表達水平。 結(jié)果:

4、 1）IPGTT結(jié)果顯示，妊娠15d和21d大鼠葡萄糖負荷后30、60、90和120 min時點的血糖值均明顯低于對照組，空腹血糖低于對照組，但沒有顯著差異。妊娠組大鼠甘油三酯水平高于對照組?？崭挂葝u素、胰島素敏感性指數(shù)均高于對照組。與對照組比較，妊娠組大鼠胰島體積明顯增大，胰島細胞致密度增加。妊娠大鼠分離出胰島直徑大于200μm的比例明顯高于對照組，胰島單個細胞直徑亦有顯著增加。以16.7 mmol/L葡萄糖孵育分離的胰島1h時

5、，妊娠組大鼠胰島素分泌水平明顯高于對照組。以2.8mmol/L葡萄糖孵育胰島1h時，妊娠組大鼠胰高糖素分泌水平明顯高于對照組。 2）催乳激素受體（PRLR）、Janus蛋白酪氨酸激酶（JAK2）、信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活子（STAT5A）和STAT5B等胰島JAK2/STAT5通路的關鍵分子，葡萄糖轉(zhuǎn)運體2（GLUT2）、葡萄糖激酶（GK）等葡萄糖代謝的關鍵分子，ATP敏感型鉀通道（KATP）、電壓依賴性鈣通道（VDCC）等胰島素分泌

6、相關的分子在妊娠大鼠胰島細胞中表達明顯增高，而電壓依賴型鉀通道（Kv）表達降低。妊娠大鼠胰島在5.6mmol/L葡萄糖刺激時，[Ca2+]I水平高于對照組，PRL孵育5天的INS-1細胞株細胞膜Kv電流亦高于對照組。主要胞吐蛋白syntaxin-1和VAMP-2的蛋白質(zhì)表達水平升高。 結(jié)論: 1）妊娠期大鼠胰島量增大，儲備功能增強，有利于其適應增加的胰島素需求，保證母體和胎兒的正常代謝； 2）催乳激素在妊娠期胰島