三氧化二砷調(diào)控HL-60細(xì)胞hTERT基因啟動子及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB機制研究.pdf

1、目的：研究三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)對 HL-60細(xì)胞人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（Human telomerase reverse transcriptase,hTERT）基因啟動子及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的作用機制。
　　方法：1.將不同濃度的As2O3作用 HL-60細(xì)胞，利用實時熒光定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)分別檢測hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平上的變化2.利用

2、RNAi技術(shù)干擾NF-κB基因表達(dá)，利用實時熒光定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)，分別檢測 HL-60細(xì)胞hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)變化，同時利用CCK-8分析法，流式細(xì)胞術(shù)分別檢測 HL-60細(xì)胞的增殖和凋亡變化。
　　結(jié)果：1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細(xì)胞后，hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)受到明顯抑制(P<0.01)。2.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)

3、，hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表達(dá)受到明顯抑制(P<0.01)。3.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)，有效的抑制HL-60細(xì)胞的增殖(P<0.01)，以干擾48h最為顯著。4.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)，有效的促進HL-60細(xì)胞的凋亡(P<0.01)。
　　結(jié)論：1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細(xì)胞后,可促進HL-60細(xì)胞凋亡，并呈一定的量效關(guān)系。2.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)可促進HL-60細(xì)胞的凋亡，抑