丹參注射液減輕缺氧-復(fù)氧性HK-2細胞損傷及白細胞黏附的胞內(nèi)信號機制研究.pdf

1、目的：探討丹參注射液減輕缺氧-復(fù)氧性(humanrenalproxiomaltubuhrcells，HK-2)細胞損傷的作用研究及機制。 方法：(1)以人近曲腎小管上皮細胞(HK-2)為研究對象；(2)采用液體石蠟覆蓋法建立缺氧/復(fù)氧模型；(3)實驗分為三個組：對照組、模型組和丹參組，每個組均設(shè)立七個時間點：缺氧4、12、24小時和缺氧24小時后復(fù)氧4、12、24、48小時，其中丹參組設(shè)立8個濃度亞組(生藥濃度)：0.05％、0

2、.10％、0.15％、0.20％、0.25％、0.30％、0.50％和1.00％；(4)檢測指標：倒置相差顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)學改變，MTT法進行活細胞計數(shù)，生化法檢測培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)含量，放射免疫法檢測腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor-a，TNF-a)的含量。(5)統(tǒng)計學處理：所有數(shù)值以均數(shù)±標準差(-x±S)表示，實驗組各時間點進行單因素方差分析，組間進

3、行LSD檢驗。P＜0.05為差異有顯著性。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件完成。 結(jié)果：(1)倒置相差顯微鏡下觀察HK-2細胞生長狀況：缺氧處理后，模型組在各時間點細胞數(shù)量均明顯降低，在缺氧24小時達最低值；與模型組比較，在丹參濃度＜0.25％各組中，HK-2細胞數(shù)量較多，細胞貼壁較好，呈扁平的多角形，折光性增加，細胞分裂相增多，連接成片，其中以0.10％丹參組細胞數(shù)量在各時間點均為最高。(2)與對照組比較，模型組在各時間點活細胞數(shù)

4、量明顯減少，在缺氧24小時到達最低值。與模型組比較，丹參組在濃度＜0.25％各組中，活細胞數(shù)量較多，其中以0.10％丹參組在各時間點為最高，差異具有顯著性(P＜0.05)，在濃度＞0.25％各組中，活細胞數(shù)量逐漸下降與模型組相比。(3)與對照組比較，模型組LDH活性升高，最高值在缺氧24小時-復(fù)氧4小時，達(42.20±1.13)IU/L和(44.25±5.44)IU/L；與模型組相比，丹參組LDH活性下降，在缺氧4、12、24小時，復(fù)

5、氧24小時有顯著性差異(p=0.07，0.019，0.006，0.017)。(4)與對照組比較，模型組TNF-a水平升高，在缺氧24小時-復(fù)氧4小時達最高值；與模型組相比，丹參組在缺氧/復(fù)氧過程各時間點中TNF-a水平降低，在缺氧4、12、24小時，復(fù)氧24、48小時差異具有顯著性(p=0.02，0.04，0.011，0.027，0.025)；與對照組相比，差異無顯著性(p＞0.05)。 結(jié)論：丹參注射液對HK-2細胞缺氧-復(fù)氧