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文檔簡介
1、銀屑病是一種常見并易復(fù)發(fā)的慢性炎癥性皮膚病。由于本病發(fā)病率較高,易于復(fù)發(fā),病程較長,尤以侵犯青壯年為多,故對(duì)患者的身體健康和精神影響甚大。因此,銀屑病是當(dāng)前皮膚科領(lǐng)域內(nèi)重點(diǎn)研究的疾病之一。隨著近年來腫瘤血管新生(angiogenesis)在癌癥研究和臨床腫瘤治療學(xué)方面取得的積極成果,使人們對(duì)非腫瘤性血管新生性疾病也表現(xiàn)出了極大的興趣。根據(jù)銀屑病皮損的組織病理特征之一是真皮乳頭層微血管擴(kuò)張和內(nèi)皮細(xì)胞增生,針對(duì)真皮內(nèi)血管新生與銀屑病關(guān)系的研
2、究成為其發(fā)病機(jī)理研究的新方向之一,并且有許多學(xué)者試圖通過抑制血管新生而達(dá)到治療銀屑病的目的。本研究通過原代培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞,從體外實(shí)驗(yàn)的角度探討維A酸類藥物伊曲替酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的調(diào)控作用,以及對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞周期的影響,從而進(jìn)一步探討通過藥物抑制血管新生,來達(dá)到治療銀屑病的目的。 本實(shí)驗(yàn)分為三個(gè)部分,第一部分為原代培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,并從直接顯微鏡下觀察形態(tài)和第Ⅷ因子相關(guān)抗原(ⅧRA)的免疫組化染色鑒定細(xì)胞;第二部分采用MTr比色法
3、檢測(cè)伊曲替酸在不同作用時(shí)間和不同濃度,對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞以及ECV-304細(xì)胞株的增殖調(diào)控;第三部分采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)伊曲替酸在不同作用時(shí)間和不同濃度,對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響。 研究結(jié)果顯示:(1)原代培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在顯微鏡下表現(xiàn)為單層生長的多角形細(xì)胞,有典型的“鋪路石”形態(tài),ⅧRA免疫組化染色見到細(xì)胞漿內(nèi)陽性的棕褐色顆粒;(2)伊曲替酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用表現(xiàn)為,隨著藥物濃度的逐漸升高,先促進(jìn)細(xì)
4、胞增殖,到一定濃度則呈抑制作用,是雙向調(diào)控趨勢(shì)。而對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞和ECV-304則表現(xiàn)為直接抑制的作用。并且伊曲替酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞的作用隨著作用時(shí)間的延長而更加顯著;(3)伊曲替酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞周期有完全不同的影響,使內(nèi)皮細(xì)胞的周期阻滯于G1期,而角質(zhì)形成細(xì)胞則被阻滯于S期;(4)伊曲替酸對(duì)ECV-304作用與作用在角質(zhì)形成細(xì)胞相一致,表現(xiàn)為直接抑制增殖,而與血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用不相一致。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)論:人
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