細(xì)胞因子在翼狀胬肉疾病發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用ELISA方法來檢測堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清中的表達(dá)，探討細(xì)胞因子在翼狀胬肉發(fā)病機(jī)制中的作用，為臨床防治此病提供一些理論依據(jù)。 研究方法：選擇大連市第三人民醫(yī)院眼科初發(fā)性翼狀胬肉患者32例(32只眼)，按病變組織局部有無充血肥厚和浸潤，將其分為兩組：(1)靜止期組22例(22只眼)，其中男10例(10只眼)，女12例(12只眼)，年齡46-78歲，平均61.2歲；

2、(2)進(jìn)行期組10例(10只眼)，其中男4例(4只眼)，女6例(6只眼)，年齡36-75歲，平均56.3歲，所有患者均無其他角、結(jié)膜疾患，確診后均行翼狀胬肉切除+結(jié)膜瓣移植術(shù)。選擇復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者8例(8只眼)，其中男4例(4只眼)，女4例(4只眼)，年齡46-67歲，平均52.6歲，確診后均行翼狀胬肉切除+羊膜移植術(shù)，術(shù)中應(yīng)用絲裂霉素。正常對照組30例(30只眼)，選擇無翼狀胬肉患者。選擇大連市第三人民醫(yī)院眼科初發(fā)性翼狀胬肉患者3例

3、(3只眼)胬肉組織，復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者3例(3只眼)胬肉組織，白內(nèi)障術(shù)后無翼狀胬肉患者3例(3只眼)正常球結(jié)膜。所有研究對象均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血3ml，采用離心機(jī)分離出血清，冷冰儲(chǔ)存?zhèn)溆谩z測時(shí)采用bFGF和IL-6酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒，所有步驟都按照說明書嚴(yán)格操作。取初發(fā)性翼狀胬肉患者胬肉組織，復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者胬肉組織，無翼狀胬肉患者的正常球結(jié)膜組織做常規(guī)H-E染色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為計(jì)量資料，用t檢驗(yàn)來分析堿性成纖

4、維細(xì)胞生長因子(bFGF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清和正常人血清中表達(dá)的差異；用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)分析二者間的相關(guān)性；用成組設(shè)計(jì)的方差分析來比較初發(fā)性翼狀胬肉靜止期，初發(fā)性翼狀胬肉進(jìn)行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中bFGF和IL-6表達(dá)的差異。 研究結(jié)果：翼狀胬肉患者血清和正常人血清中均有堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)的表達(dá)，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，翼狀胬肉患者組與正常對照組有

5、顯著性差異。bFGF和IL-6表達(dá)呈正相關(guān)，即同向表達(dá)，說明二者在翼狀胬肉的發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)中起協(xié)同作用。在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期，初發(fā)性翼狀胬肉進(jìn)行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中bFGF和IL-6表達(dá)的比較中，初發(fā)性翼狀胬肉和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中的表達(dá)相比有顯著性的差異，而在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期和進(jìn)行期患者血清中的表達(dá)沒有顯著性差異。正常結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)簡單，基質(zhì)層細(xì)胞數(shù)量較少，而翼狀胬肉上皮層可見不同程度增生，基質(zhì)中可有明顯增生和變

6、性兩種表現(xiàn)。以增生為主的翼狀胬肉病變組織內(nèi)膠原纖維排列密集，成纖維細(xì)胞增殖活躍，新生血管豐富，尤其在復(fù)發(fā)性翼狀胬肉組織中增殖大量成纖維細(xì)胞大量存在，并表現(xiàn)出一定的侵襲性，提示成纖維細(xì)胞具備某種轉(zhuǎn)化細(xì)胞特性。 結(jié)論：在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期、進(jìn)行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中均存在bFGF和IL-6的異常表達(dá)，與正常人血清相比均具有顯著性差異。在初發(fā)性翼狀胬肉與復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清bFGF和IL-6表達(dá)相比有顯著性差異，但初發(fā)性翼狀

7、胬肉的靜止期和進(jìn)行期患者血清bFGF和IL-6的表達(dá)沒有顯著性差異，說明細(xì)胞因子在翼狀胬肉的發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)中起著重要作用。bFGF和IL-6這兩種因子在翼狀胬肉患者血清中的表達(dá)有明顯的相關(guān)性。翼狀胬肉組織病理切片中可見增生和變性兩種表現(xiàn)。 研究討論：翼狀胬肉是一種慢性增生性眼病。增生的組織肥厚、血管擴(kuò)張，術(shù)后易復(fù)發(fā)。病理學(xué)研究表明，翼狀胬肉組織中含有大量增生的成纖維細(xì)胞，血管的增生和退變，以及球結(jié)膜上皮細(xì)胞的異常增殖，其特

8、點(diǎn)與腫瘤組織相似。近年來研究表明：細(xì)胞因子在炎癥反應(yīng)及成纖維細(xì)胞增生方面起著重要的作用，其在翼狀胬肉發(fā)病機(jī)制中的作用越來越引起人們的關(guān)注。它們在正常人血清中也有不同程度的表達(dá)，但在翼狀胬肉患者的血清中表達(dá)紊亂。某些異常的生物學(xué)行為與這些過度表達(dá)的因子所產(chǎn)生的作用有關(guān)。我們通過研究堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清中的表達(dá)，旨在進(jìn)一步探討其發(fā)病機(jī)制。堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)是一種重要

9、的促創(chuàng)傷愈合因子，它不但能促進(jìn)創(chuàng)面的愈合，而且對血管和神經(jīng)的再生有很強(qiáng)的促進(jìn)作用。bFGF對成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞具有分化，增殖，遷移及趨化作用。它可以直接刺激內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂和趨化性，在新生血管的形成中起重要作用，而且可促進(jìn)血管腔的形成。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，初發(fā)性及復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清標(biāo)本中有bFGF特異性表達(dá)，與正常結(jié)膜組相比具有顯著性差異。提示翼狀胬肉患者血清中bFGF處于較高水平，通過促進(jìn)翼狀胬肉上皮細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)其臨近的上

10、皮下基質(zhì)淺層新生血管形成和成纖維細(xì)胞迅速增殖，從而對促進(jìn)翼狀胬肉增殖和向角膜方向侵襲生長起到一定作用。白細(xì)胞介素-6(IL-6)作為一種重要的炎癥細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、參與炎癥反應(yīng)、影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，參與了多種疾病的發(fā)生、發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，初發(fā)性及復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清標(biāo)本中IL-6有特異性表達(dá)，與正常對照組相比具有顯著性差異。本實(shí)驗(yàn)術(shù)中切除翼狀胬肉組織并行常規(guī)H-E染色發(fā)現(xiàn)：成纖維細(xì)胞增殖活躍，新生血管豐富，大量淋巴細(xì)

11、胞、漿細(xì)胞浸潤以及肥大細(xì)胞反應(yīng)，提示在翼狀胬肉發(fā)病機(jī)理中免疫因素的存在。機(jī)體的各種細(xì)胞因子之間互相影響，互相制約，形成一個(gè)非常嚴(yán)密、非常協(xié)調(diào)的處于動(dòng)態(tài)平衡的因子網(wǎng)，以此來保證機(jī)體的各種機(jī)能和正常的活動(dòng)，其生物學(xué)特征具有多效性和交疊性。翼狀胬肉組織中有大量的新生血管、纖維母細(xì)胞和彈性纖維及膠原纖維增生，并可見大量的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤和肥大細(xì)胞反應(yīng)。翼狀胬肉形成的直接原因是大量增生的成纖維細(xì)胞和血管的增生與退變，bFGF可促進(jìn)新生血管的形

12、成，成纖維細(xì)胞迅速增殖，加重局部組織炎性反應(yīng)，從而促進(jìn)IL-6的分泌。IL-6的分泌增強(qiáng)，又進(jìn)一步促使纖維母細(xì)胞、彈性纖維及膠原纖維的增生和變性細(xì)胞的浸潤，促進(jìn)翼狀胬肉的發(fā)生和發(fā)展。正常結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)簡單，基質(zhì)層細(xì)胞數(shù)量較少，而翼狀胬肉基質(zhì)中可有明顯增生和變性兩種表現(xiàn)。以增生為主的翼狀胬肉病變內(nèi)膠原纖維排列密集，成纖維細(xì)胞增殖活躍，新生血管豐富，尤其在復(fù)發(fā)性翼狀胬肉組織中增殖大量成纖維細(xì)胞大量存在，并表現(xiàn)出一定的侵襲性。本實(shí)驗(yàn)的臨床意義在

13、于術(shù)前可以通過ELISA方法檢測患者血清中的細(xì)胞因子含量，明確患者是否為翼狀胬肉術(shù)后復(fù)發(fā)的高危人群，以此來指導(dǎo)手術(shù)。術(shù)前滴用含激素類滴眼液，術(shù)中應(yīng)用絲裂霉素等抑制組織生長藥物，或/和行羊膜移植術(shù)，術(shù)后短期內(nèi)仍需應(yīng)用激素類滴眼液、眼膏或注射液及平陽霉素注射液等藥物來降低其復(fù)發(fā)率。但因絲裂霉素及平陽霉素屬于抗腫瘤藥物，對機(jī)體有一定的副作用，羊膜價(jià)格昂貴，所以上述方法不能在臨床中普遍應(yīng)用，只有那些術(shù)后復(fù)發(fā)的高危人群，我們才謹(jǐn)慎地采用此兩種方法