紫外線聯(lián)合臭氧及高溫誘導人外周血淋巴細胞凋亡的研究.pdf

1、[目的]
　　 有學者研究應用紫外線聯(lián)合臭氧及高溫誘導人外周血細胞凋亡，再將全血重新回注入患者體內，通過凋亡的血細胞(主要是淋巴細胞)誘導機體產生免疫耐受和抗炎反應，從而改善一些免疫炎癥性疾病患者的預后。本研究通過觀察紫外線、臭氧和高溫對人外周血淋巴細胞的誘導作用，從而建立穩(wěn)定的血細胞凋亡誘導系統(tǒng)，以供基礎及臨床研究。
　　 [方法]
　　 取健康成人外周靜脈血，分別及聯(lián)合應用紫外線、高溫和臭氧進行誘導，采用淋巴

2、細胞分離液密度梯度離心分離外周血淋巴細胞。通過瑞氏-姬姆薩染色涂片鏡檢、瓊脂糖DNA凝膠電泳及流式細胞術定量測定，從細胞形態(tài)學、分子生物學以及細胞學水平觀察細胞凋亡情況。
　　 [結果]
　　 紫外線照射、高溫、臭氧誘導的淋巴細胞在瑞氏-姬姆薩染色后光鏡下觀察均可發(fā)現(xiàn)凋亡形態(tài)學改變，DNA電泳呈現(xiàn)有一定間隔的梯狀條帶：流式細胞術定量測定經單獨紫外燈(15W，照射距離5cm)照射10 min，20 min，30 min，凋

3、亡率分別為12.03％，16.98％，26.58％；單獨經臭氧濃度分別為14.5、29、43.5μg/mL處理20 min，凋亡率分別為6.76％，26.38％，35.1％；單獨經溫度分別為40、42.5、45℃處理20 min，凋亡率分別為15.93％，26.83％，39.88％；經溫度分別為40、42.5、45℃水浴聯(lián)合紫外照射20 min，凋亡率分別為26.3％，36.3％，54.45％；經臭氧濃度分別為14.5、29、43.5μ

4、g/mL聯(lián)合42.5℃水浴及紫外照射20 min共同誘導，其凋亡率分別達49.6％，76.15％，67.83％；淋巴細胞在高溫、紫外線照射及臭氧的共同影響下，其誘導細胞凋亡反應較單一或兩因素聯(lián)合誘導顯著提高(P＜0.05)，凋亡率在一定范圍內可呈現(xiàn)時間和劑量效應關系。42.5℃水浴、臭氧濃度29μg/mL聯(lián)合紫外照射20min后所致淋巴細胞凋亡率最高。
　　 [結論]
　　 單獨應用紫外線、溫度及臭氧可誘導人外周血淋巴細