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1、目的:利用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)平面回波序列(echo planar imaging,EPI)的血氧水平依賴(blood oxygenation leveldependent,BOLD)技術(shù)分別在開穴和閉穴時(shí)在足陽(yáng)明胃經(jīng)(stomachmeridian,ST)和足少陰腎經(jīng)(kidney meridian,KI)上取穴配伍刺激后進(jìn)行腦功能成像實(shí)驗(yàn)研究,并于上述2條經(jīng)脈所取穴位周圍選取2個(gè)
2、非穴位針刺點(diǎn)進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照,探討不同時(shí)辰針刺不同經(jīng)絡(luò)后引起的腦功能變化及其各功能區(qū)在腦內(nèi)定位的異同和分布規(guī)律,研究探討時(shí)間針灸學(xué)的原理和依據(jù),并尋找臨床針灸不同經(jīng)絡(luò)可以治療不同疾病的原因,尋找不同時(shí)辰針灸同一經(jīng)絡(luò)治療效果差異的中樞原因。 方法: 選擇無(wú)任何中樞神經(jīng)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及體征的健康在校大學(xué)生、碩士研究生志愿者40名,其中男性22人,女性18人,年齡20~30歲,平均23歲。所有志愿者均為右利手,實(shí)驗(yàn)前1周內(nèi)
3、無(wú)任何服藥史及針灸史,女性志愿者避免月經(jīng)期實(shí)驗(yàn)。40名志愿者隨機(jī)分為兩組,其中一組在足陽(yáng)明胃經(jīng)開穴和閉穴時(shí)電針配伍針刺足三里與上巨虛兩穴位后進(jìn)行磁共振腦功能成像實(shí)驗(yàn),并同時(shí)在開、閉穴時(shí)段內(nèi)于上述所取穴位周圍選取2個(gè)非穴位針刺點(diǎn)進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照。另一組在足少陰腎經(jīng)開穴和閉穴時(shí)配伍電針針刺太溪與復(fù)溜兩穴位后進(jìn)行磁共振腦功能成像實(shí)驗(yàn),并同時(shí)在開、閉穴時(shí)段內(nèi)于上述所取穴直周圍選取2個(gè)非穴位針刺點(diǎn)進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)作為對(duì)照。每個(gè)志愿者共進(jìn)行4次
4、實(shí)驗(yàn),每人的實(shí)驗(yàn)順序采用隨機(jī)抽簽的方式?jīng)Q定,同一志愿者的相鄰2次實(shí)驗(yàn)之間至少間隔3天。 磁共振成像設(shè)備使用Siemens公司產(chǎn)1.5 T 63 SP Magnetom Sonata Maestro Class超導(dǎo)磁共振掃描儀,梯度場(chǎng)強(qiáng)度40 mT/m/s。四通道相控陣線圈。常規(guī)解剖像采用自旋回波(spin echo,SE)序列軸位T<,1> WI。掃描線平行于前連合與后連合之間的連線(AC-PC線),掃描范圍自額頂部頭皮組織至顱
5、底,覆蓋整個(gè)大腦及小腦實(shí)質(zhì),共35層。成像參數(shù)TR=500 ms,TE=11 ms,層厚4 mm,層間隔0.4 mm,視野(FOV)200 mm,激勵(lì)次數(shù)2,反轉(zhuǎn)角度70°,矩陣192×75,帶寬130 Hz/Px,成像時(shí)間4分54秒。采用與T<,1>WI完全相同的掃描方位、掃描角度、位置、范圍、層厚、層間距、層數(shù)、視野進(jìn)行場(chǎng)圖(field mapping)掃描和磁共振腦功能成像(functional MRI,fMRI)。fMRI使用B
6、OLD法,成像參數(shù)為TR=3000 ms,TE=50 ms,激勵(lì)次數(shù)1,反轉(zhuǎn)角度90°,矩陣64×100,帶寬2604 Hz/Px,成像時(shí)間12分21秒,共采集245次。 電針儀使用上海醫(yī)療器械高技術(shù)公司生產(chǎn)的G6805-2多功能治療儀,連續(xù)波,頻率2 Hz,電壓6伏,電流0.8毫安~1.4毫安。針灸毫針使用蘇州醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)的“華佗牌”針灸針,規(guī)格為φ0.35 mm×40 mm。 實(shí)驗(yàn)采用“OFF-ON-OFF”
7、即“靜息—針刺—靜息”設(shè)計(jì)模式。功能成像BOLD序列采集245次,其中第1~85次為靜息狀態(tài),第86次采集開始時(shí)扎針并同時(shí)通電刺激,第165次采集結(jié)束時(shí)拔針,隨后的第166~245次采集為靜息狀態(tài)。嚴(yán)格控制所有實(shí)驗(yàn)的實(shí)施時(shí)間,統(tǒng)一選擇時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn),足陽(yáng)明胃經(jīng)開穴時(shí)(辰時(shí),早7-9點(diǎn))和閉穴時(shí)(戊時(shí),晚7-9點(diǎn)),足少陰腎經(jīng)開穴時(shí)(申時(shí),下午5-7點(diǎn))和閉穴時(shí)(亥時(shí),晚9-11點(diǎn))。 實(shí)驗(yàn)前分別測(cè)量每位受試者的血壓、呼吸頻率及脈搏
8、。所有受試者選擇統(tǒng)一的視聽屏蔽環(huán)境。用棉球塞緊外耳道并佩戴耳機(jī)、眼罩,磁體室內(nèi)僅保留微弱燈光,供針灸照明用。實(shí)驗(yàn)前保證每位志愿者靜息15~30分鐘。 采用運(yùn)行于Matlab平臺(tái)的SPM99(SPM99,The Welcorne Department of Cognitive Neurology,University College London,UK)分析軟件將實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。為減少實(shí)驗(yàn)開始時(shí)掃描序列轉(zhuǎn)換、噪音變頻及受試者
9、心理因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,數(shù)據(jù)處理時(shí)將掃描初始的前5次采集得到的數(shù)據(jù)去除,共用240幅圖像參加分析。圖像經(jīng)過對(duì)齊后,標(biāo)準(zhǔn)化到MNI (montreal neurologic institute,加拿大蒙特利爾神經(jīng)研究所)空間,采用8×8×8 mm半高寬高斯核平滑。平滑后的數(shù)據(jù)按照廣義線性模型進(jìn)行估計(jì),針刺期間數(shù)據(jù)減去第1個(gè)靜息狀態(tài)數(shù)據(jù)出現(xiàn)陽(yáng)性腦功能信號(hào)者為腦區(qū)信號(hào)升高或激活;反之,第1個(gè)靜息狀態(tài)數(shù)據(jù)減去針刺期間數(shù)據(jù)出現(xiàn)陽(yáng)性腦功能信號(hào)者為
10、腦區(qū)信號(hào)減低或抑制。以P<0.001,k≥30作為閾值。 結(jié)論: 1.腦功能磁共振成像觀察到的不同時(shí)辰針灸后中樞效應(yīng)的差異,直觀形象地證實(shí)了子午流注學(xué)說的客觀存在。不同時(shí)辰針刺非穴點(diǎn)后,沒有這種差異。 2.不同時(shí)辰針刺足陽(yáng)明胃經(jīng)和足少陰腎經(jīng)后,腦功能激活信號(hào)增高腦區(qū)和信號(hào)減低抑制腦區(qū)均有差異。開穴時(shí)段內(nèi)兩經(jīng)絡(luò)激活區(qū)和抑制區(qū)的數(shù)目和范圍要比閉穴時(shí)段內(nèi)多和廣。這可能不同時(shí)辰針灸同一經(jīng)絡(luò)治療效果差異的原因之一。
11、 3.開、閉穴不同時(shí)間配伍刺激足陽(yáng)明胃經(jīng)和足少陰腎經(jīng)的兩穴位后,激活與抑制的腦區(qū)既有相同之處,又有不同之別。而且開穴時(shí)可以形成完整的中樞激活與反射環(huán)路,閉穴時(shí)則無(wú)法形成完整的環(huán)路。依此我們可以解釋臨床上不同時(shí)間針灸同一經(jīng)絡(luò)的療效有交叉重疊,也有明顯區(qū)別的現(xiàn)象。 4.開、閉穴配伍刺激足陽(yáng)明胃經(jīng)和足少陰腎經(jīng)的2穴位后都可以不同程度地激活、抑制屬于“內(nèi)臟腦”的不同腦區(qū)。提示上述2條經(jīng)絡(luò)的止痛效果可能都是通過重新調(diào)節(jié)“內(nèi)臟腦”的各個(gè)腦區(qū)
12、的功能活動(dòng),使之達(dá)到新的功能激活與抑制平衡而實(shí)現(xiàn)的。這與中醫(yī)治病陰陽(yáng)平衡理論有一致性。而且,“內(nèi)臟腦”的激活與抑制同一經(jīng)絡(luò)開、閉穴有重疊,這可能是不同時(shí)段治療效應(yīng)既相同又有差異的原因之一。 5.開、閉穴時(shí)針刺足陽(yáng)明胃經(jīng)最大激活區(qū)均在右側(cè)中央前回,而最大抑制腦區(qū)開穴時(shí)在右側(cè)眶內(nèi)側(cè)回,閉穴時(shí)在右側(cè)直回。針刺足少陰腎經(jīng)開穴時(shí)最大激活區(qū)在雙側(cè)扣帶回,而閉穴時(shí)在左側(cè)小腦。最大抑制腦區(qū)均在右側(cè)眶內(nèi)側(cè)回。不同時(shí)辰針灸同一經(jīng)絡(luò)最大激活和/或最大
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