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文檔簡介
1、目的:腫瘤患者普遍存在免疫力低下的狀況。早在上世紀七十年代,統(tǒng)計資料表明在發(fā)生多器官功能衰竭或癌擴散之前,近50%的癌癥患者是死于各種感染。此外,通過疫苗主動免疫誘導針對腫瘤特異抗原的CD8+T細胞應答是現(xiàn)代腫瘤免疫治療的發(fā)展方向之一,然而,往往在正常機體能激發(fā)有效的CD8+T細胞應答的疫苗,在荷瘤機體中效果并不理想。CD8+T細胞是參與抗感染免疫和機體抗腫瘤免疫的主要效應細胞,其致敏、增殖、分化均在二級淋巴器官中進行,隨后效應性CD8
2、+T細胞遷移到感染或腫瘤局部。腫瘤局部觀察到的免疫調(diào)節(jié)細胞或因子在腫瘤局部高度富集或高表達,只能部分解釋抗腫瘤免疫低下的現(xiàn)象,不能解釋腫瘤環(huán)境下抗感染免疫低下的現(xiàn)象。腫瘤環(huán)境是否影響二級淋巴器官中針對外來微生物抗原或針對自身的腫瘤抗原的CD8+T細胞的啟動,目前知之甚少。因此本實驗旨在探討腫瘤情況下,二級淋巴器官中抗感染特異性CD8+T細胞免疫應答的變化及其可能機制,為腫瘤患者免疫狀況調(diào)節(jié)提供理論依據(jù)。
方法:在建立小鼠荷瘤模
3、型的基礎上,尾靜脈感染表達OVA抗原的李斯特菌(OVA-ListeriaMonocytogenes,OVA-LM),觀察小鼠生存曲線的變化;在荷瘤感染小鼠模型中,通過流式Pentamer染色和胞內(nèi)細胞因子染色技術(shù)檢測小鼠抗OVA257-264表位特異性CD8+T細胞抗原呈及遞情況免疫應答水平的變化;通過標記羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescindiacetatesuccinimidylester,CFSE)的
4、OT-Ⅰ細胞過繼轉(zhuǎn)移小鼠,觀察小鼠體內(nèi)抗原特異性CD8+T細胞增殖的影響;流式細胞技術(shù)分析荷瘤情況下小鼠脾臟Treg細胞及CD11b+Gr-1+細胞比例變化。
結(jié)果:
1.荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明顯縮短。
2.荷瘤小鼠脾臟抗OVA257-264表位特異性CD8+T細胞免疫應答顯著下調(diào)。
3.抗原特異性CD8+T細胞增殖速率沒有顯著變化,但是細胞總數(shù)明顯下降。
4.荷瘤小鼠脾臟
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