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文檔簡介
1、研究目的: 1.探討膳食因素與兒童哮喘之間的關(guān)系。 2.了解哮喘患者機體血清SOD、MDA、GSH—Px、T—AOC的水平,并探討機體中VitA、VitC、VitE水平與哮喘的關(guān)系。 3.了解兒童ADAM33基因位點多態(tài)性與兒童哮喘發(fā)病之間的關(guān)系。 研究對象和方法: 1、研究對象 把從花都、白云和海珠三個區(qū)8個小學7635名兒童中篩選出有醫(yī)生確診為哮喘的兒童納入病例組。把無既往哮喘診斷史,
2、無喘息,無伴有呼吸短促的喘息,無伴有睡眠阻礙的喘息,無運動性喘息和夜間咳嗽的兒童納入健康對照組。檢測血抗氧化水平還要求是非吸煙者,未長期持續(xù)服用抗氧化補充劑、抗氧化維生素采血前未服用抗炎藥物,調(diào)查前兩周內(nèi)無呼吸道感染及肺部疾病,調(diào)查前四周無哮喘急性加重癥狀,空腹采血。 2、研究方法 2.1問卷調(diào)查 本研究采用國際標準調(diào)查問卷,調(diào)查內(nèi)容包括兒童本人有無哮喘診斷史,父母哮喘診斷史,父母過敏診斷史,過敏性氣管炎診斷史,
3、支氣管炎診斷史,細支氣管診斷史,肺炎診斷史,其他呼吸系統(tǒng)疾病診斷史,有無被動吸煙,該兒童有無呼吸系統(tǒng)癥狀,有何呼吸系統(tǒng)癥狀,膳食攝入情況。分家長問卷和學生問卷。本研究主要采用家長問卷信息。 2.2膳食回顧調(diào)查 采用稱重法和24小時膳食記錄調(diào)查結(jié)合的方法,獲取研究對象三天的膳食情況。要求寫出一天三餐進餐時間及加餐時間,寫出食用食物名稱,烹調(diào)方法和攝入量。 2.3體格測量 按標準方法進行體格測量,指標包括身高
4、、體重等,并計算體質(zhì)指數(shù)(Body Mass Index,BMI)。 2.4血脂 空腹采血,清除法測定。 2.5抗氧化維生素水平檢測 用高效液相色譜法測定血漿中VitA、VitC、VitE水平。 2.6氧化/抗氧化狀態(tài)的檢測 按試劑盒說明方法測定血清中SOD、MDA、T—AOC、GSH—Px。 2.7 ADAM33基因多態(tài)性檢測 提取研究對象的全血基因組DNA,用聚合酶鏈反
5、應(yīng).限制性片斷長度多態(tài)性分析方法(PCR—RFLP)測定ADAM33基因多態(tài)性,然后隨意選取擴增后的樣品送上海英駿生物科技有限公司進行序列檢測。 2.8統(tǒng)計分析 2.8.1建立數(shù)據(jù)庫 調(diào)查問卷用Epidate軟件輸入。膳食記錄用營養(yǎng)計算器V1.6建立數(shù)據(jù)庫。 2.8.2膳食資料的處理 數(shù)據(jù)庫的膳食資料導出為Excel表格,算出三大營養(yǎng)素供能比。 2.8.3用SPSS11.5統(tǒng)計分析
6、 用Microsoft Excel2000建立數(shù)據(jù)庫,采用SPSS11.5軟件進行分析,檢驗水準=0.05,組間比較采用方差分析和t檢驗。血液生化指標之間關(guān)系用多元相關(guān)分析。父母、自身因素與兒童哮喘的關(guān)聯(lián)強度用OR描述,血清中維生素水平與哮喘癥狀的關(guān)聯(lián)用OR描述,以單因素和多因素Logistic回歸模型分別計算粗OR和校正OR值及其95%可信區(qū)間。Hardy—Weinberg平衡吻合度檢驗,ADAM33基因頻率,等位基因頻率用SHEsi
7、s網(wǎng)上軟件進行分析。 結(jié)果: 1.研究對象的基本情況 本次調(diào)查共篩查出哮喘兒童106名(其中45人為現(xiàn)患哮喘,61人為既往哮喘),有95名兒童經(jīng)家長同意參加調(diào)查,其中84人參加體檢和抽血。對照組106名兒童中,99名兒童經(jīng)父母同意參加調(diào)查,其中89人參加體檢和抽血。病例組和對照組年齡、性別、身高、體重、BMI無顯著性差異。 2.父母因素與哮喘的關(guān)系 父母哮喘患病史與兒童哮喘發(fā)病之間無關(guān)聯(lián)。父母過敏
8、史與兒童哮喘發(fā)病有顯著關(guān)聯(lián)其粗OR值分別為6.04(95%CI:2.14-17.08)和7.59(95%CI:2.13-27.03)。在校JT混雜因素后是4.42(95%CI:1.28-15.29)和4.48(95%CI:1.10-18.22),仍然有統(tǒng)計學意義。 3.兒童自身因素與哮喘的關(guān)系 顯示兒童自身因素與哮喘的關(guān)系。兒童過敏史與哮喘之間呈顯著關(guān)聯(lián)(粗OR=9.59,95%CI:3.72-24.74;校正OR=6.
9、82,95%CI:2.11-22.03)。低出生體重、早產(chǎn)和未母乳喂養(yǎng)的兒童發(fā)生哮喘的風險與其對照組未見顯著性差異。 4.血脂的比較 既往病例的血漿LDL—C水平低于對照組,現(xiàn)患病例的LDL—C水平高于對照組,但是差別無統(tǒng)計學意義。病例組TC水平高于對照組,但是差別無統(tǒng)計學意義。但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 5.血漿抗氧化維生素水平與哮喘的關(guān)系 哮喘兒童血漿中VitA、VitC、VitE的水平低于
10、健康兒童,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 6.體內(nèi)氧化/抗氧化狀態(tài)與哮喘的關(guān)系 病例與對照SOD、MDA、T—AOC水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),病例組中GSH—Px高于對照組,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 各生化指標之間關(guān)系 對照組中VitA與GSH—Px活力正相關(guān)(r=0.272,P<0.05),VitC與MDA負相關(guān)(r=—0.281,P<0.05),SOD與GSH—Px活力正
11、相關(guān)(r—0.329,P<0.01),LDL—C與SOD正相關(guān)(F0.275,P<0.05),SOD與MDA存在負相關(guān)(r=—0.305,P<0.05),MDA與T—AOC負相關(guān)(r=—0.294,P<0.05),GSH—Px與TC正相關(guān)(r=0.268,P<0.05)。病例組中MDA與SOD負相關(guān)(r=—0.311,P<0.05),GSH—Px與T—AOC正相關(guān)(r=0.274,P<0.05)。 8.各生化指標與喘息、氣促之間
12、關(guān)系 單因素Logistic回歸分析,發(fā)現(xiàn)VitA、VitC、VitE與喘息癥狀有負關(guān)聯(lián),OR值分別為0.003(95%CI:0.00-0.03),0.80(95%CI:0.73-0.88),0.80(95%CI:0.66-0.96),TC與喘息癥狀有正關(guān)聯(lián)OR值為1.51(95%CI:1.02-2.25),校正了性別、年齡、BMI、父母哮喘史、父母過敏史、兒童過敏史、早產(chǎn)、低出生體重、母乳喂養(yǎng)和被動吸煙等因素的多因素Logis
13、tic回歸分析結(jié)果顯示VitA、VitC、VitE與喘息癥狀仍有負關(guān)聯(lián),OR值分別為0.00(95%CI:0.00-0.03),0.73(95%CI:0.63-0.86)0.64(95%CI:0.48-0.87),LDL—C與喘息癥狀有負關(guān)聯(lián)OR值為0.16(95%CI:0.03-0.80)。各生化指標與氣促沒有明顯關(guān)聯(lián)。 9.膳食資料 膳食調(diào)查結(jié)果顯示膳食能量、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)供能比、碳水化合物、碳水化合物供能比、膳食纖
14、維、膽固醇、VitA、VitC、VitE的攝入兩組比較差別無統(tǒng)計學意義。病例組脂肪攝入高于對照組,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。病例組脂肪供能比高于對照組,差別近乎顯著(P=0.053)。 10.ADAM33基因多態(tài)性與哮喘的關(guān)系 受調(diào)查兒童中,T1位點三種基因型在病例組分布頻率為TT是88.5%,TC是10.3%,CC是1.1%。在對照組分布頻率為TT是75.7%,TC是21.6%,CC是2.7%。等位基因C在對照
15、組和健康對照組分布頻率分別是6.3%,13.5%。V4位點三種基因型在病例組分布頻率分別是33.0%,48.9%,18.2%,在健康對照組分布頻率是32.0%,45.3%,22.7%。等位基因C在病例組和健康對照組的分布頻率分別是42.6%,45.3%。ADAM33基因的T1位點和V4位點檢測結(jié)果進行Hardy—Weinberg平衡吻合度檢驗,顯示基因型分布符合遺傳平衡規(guī)律。T1位點和V4位點病例組和對照組比較基因頻率和基因型頻率差別無
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