草酸鈣結石的成因與碎石脆性研究.pdf

1、目的：1.應用紅外光譜技術對尿石成分行定性定量分析，建立定量分析校準曲線回歸方程，獲取尿石成分資料，為泌尿道結石的成因研究積累資料； 2.應用高效液相色譜技術分析24小時尿液中的微量有機酸，建立草酸、枸椽酸的工作曲線，獲取24小時尿液成分資料，為泌尿道結石的成因研究積累資料； 3.分析草酸鈣結石患者24小時尿液成分變化，為探討草酸鈣結石的成因提供依據； 4.探討CT在預測一水草酸鈣結石碎石脆性中的價值，為草酸鈣結

2、石的治療提供幫助。 方法：對尿石癥患者，術前常規(guī)行24小時尿液成分分析和CT掃描，獲取尿石癥患者24小時尿液成分資料和尿結石的CT影像學資料，術后采用傅立葉變換紅外光譜法(Fourier trarlsform infrared spectrophotometer，F(xiàn)TIR)行尿石成分分析。選擇草酸鈣結石(calcium oxalate，CO)(＞94％)患者72例和健康志愿者40例，分為一水草酸鈣(calcium oxalate

3、 morlohydrate，COM)組、二水草酸鈣(calcium oxalate dihydrate，COD)組和正常對照組，對其24小時尿液成分行統(tǒng)計學分析。選擇COM(＞94％)結石50例為實驗對象，行體外沖擊波碎石(extracorporeal shockwave lithotripsy，ESWL)，記錄碎石次數，將COM結石分為CT結構同質組、CT結構異質組、介于二者之間組，對其碎石次數行統(tǒng)計學分析；將COM結石分為高CT值組

4、、低CT值組，對其碎石次數行統(tǒng)計學分析。 1. 24小時尿液成分分析方法：尿草酸、尿枸椽酸的測定采用高效液相色譜法(high performance liquidchromatography，HPLC)，以不同濃度草酸(99.8％)和枸椽酸(99.8％)為標準液制備標準曲線，尿液樣品經酸化、過濾、除蛋白、冷卻、離心后進樣，測定曲線下面積，計算草酸及枸櫞酸的含量；尿量以量筒準確量??；尿PH值以精密PH計測定；尿鈣、尿鎂的測定采用乙二胺四乙

5、酸二鈉絡合滴定法；尿磷的測定采用鉬蘭比色法；尿酸的測定采用磷鎢酸比色法。 2. 尿石成分分析方法：FTIR分析采用透射法測其吸收光譜，定性分析時將所得樣品紅外光譜圖與尿結石成分譜庫中標準譜圖對照，根據特征峰頻率、強度及峰寬等判斷結石成分，定量分析采用校準曲線法，先建立校準曲線回歸方程，再根據定性分析結果選擇適當的曲線行定量分析。 3.CT值的測量及CT結構異質性評估方法：測定CT值時，分測三個層面，每個層面取三等分點，分

6、別記錄各點CT值，計算總體CT平均值為該結石CT值；行結構異質性評估時，分別由2個不同觀察者來判斷結石的結構異質性，了解結石的影像學特征，有明顯小葉、中空、分層及異常密度影為結構異質，否則為結構同質。 4. 體外沖擊波碎石方法：對該50例COM結石行體外沖擊波碎石，取市售帶皮豬肉一塊、鴨腸一段，將結石固定于鴨腸腸腔內，再將鴨腸固定于豬肉，然后將豬肉固定于一自制梯形木板架上，定位后行ESWL，記錄碎石次數。 5.統(tǒng)計學分析

7、方法：所有統(tǒng)計學分析都應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。將COM(＞94％)患者40例、COD(＞94％)患者32例和健康志愿者40例分為COM組、COD組、正常對照組，對其24小時尿量、尿PH值、尿鈣、尿磷、尿鎂、尿酸、尿草酸、尿枸櫞酸分別行統(tǒng)計學分析，分別采用單因素方差分析，計量資料用(X±s)，組間比較用S-N-K法和LSD法；將COM(＞94％)結石50例，根據CT結構異質性分類分為CT結構同質組、CT結構異質組、介于二者之間組，對

8、其碎石次數行統(tǒng)計學分析，采用單因素方差分析，計量資料用X±s，組間比較用S-N-K法和LSD法：將COM(＞94％)結石50例，根據CT值大小分為高CT值組、低CT值組，對其碎石次數行統(tǒng)計學分析，采用獨立樣本t檢驗，計量資料用X±s。 結果：1.對2006年6月至2007年12月在我科住院的尿石癥患者516例行尿石成分紅外光譜分析，定性分析時，CO的檢出率為70.31％，略低于文獻報道的80％以上，COM的檢出率為66.67％，

9、略低于文獻報道的67-71％；定量分析時，分別建立了校準曲線回歸方程，COM在1324cm-1處的校準曲線回歸方程：I＝-3.06×10-4x-3.03×10-3，r=0.993，COD在1316cm-1處的校準曲線回歸方：I=5.50×10-5x+9.20×10-5，r=0.997。 2.采用HPLC法測定24小時尿液中草酸和枸櫞酸的含量，分別得到草酸的工作曲線：Aoxa=12528.4Coxa-641.9，r=0.999，枸

10、椽酸的工作曲線：Acit＝1607.5Ccit-13.8，r＝0.999。 3.對72例COM(＞94％)結石患者及40例健康志愿者行24小時尿液成分分析顯示：COD組、COM組的尿量明顯低于正常對照組(P＜0.05)，COD組的尿鈣、尿磷、尿草酸明顯高于COM組和正常對照組(P＜0.05)，COM組的尿枸櫞酸明顯低于COD組和正常對照組(P＜0.05)。 4.對50例COM(＞94％)結石行碎石脆性研究顯示：根據CT結構異質性

11、分組，分為A組(CT結構同質)、B組(CT結構異質)和C組(介于二者之間)，兩兩比較，A組碎石次數多于B組和C組(P＜0.05)，C組的碎石次數多于B組(P＜0.05)；根據CT值大小分組，分為1組(CT值1001～1722 Hu)、2組(CT值251～1000 Hu)，1組和2組碎石次數比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.568)。 結論：1.FTIR技術可用于對尿石成分的定性定量分析，方法簡便，靈敏度高，重復性好，可為泌尿道結石的

12、成因研究提供詳細的資料； 2.HPLC技術可用于測定24小時尿液中微量草酸和枸櫞酸的含量，靈敏度高，特異性強，可為24小時尿液中微量有機物的檢測提供更簡便可靠的方法，可為泌尿道結石的成因研究提供依據； 3.結石抑制物枸櫞酸的缺乏是形成COM結石的主要原因之一，高尿鈣、高尿磷、高尿草酸易于形成COD結石，尿量減少可促進兩種C0結石的形成。 4.COM結石的碎石脆性與其CT結構異質性相關，CT結構同質的COM結石碎石