肽基脯氨酰順反異構酶在肝細胞癌中的表達及其臨床病理意義.pdf

1、目的：研究肽基脯氨酰順反異構酶（peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting1，Pin1）、死亡相關蛋白激酶1（Death-associated protein kinase1，DAPK1）及β-連環(huán)蛋白（β-catenin）在肝細胞癌（hepatocelluler carcinoma，HC C）中的表達情況，并分析其臨床病理意義。
　　方法：
　　1、采用實時熒光

2、定量聚合酶鏈反應（Real-time PCR）技術，從mRNA水平上檢測34例HCC及相應遠癌肝組織中Pin1的表達情況
　　2、采用蛋白免疫印跡（Western Blot）方法在蛋白質水平上分別檢測了29例HCC及癌旁正常肝組織中Pin1、DAPK1及β-catenin的蛋白表達情況；
　　3、采用免疫組織化學染色（IHC）方法結合組織芯片技術，檢測184例HCC、癌旁肝組織中Pin1、DAPK1及β-catenin的蛋白

3、表達情況；并分析上述蛋白表達的相關性、與HC C臨床病理參數(shù)的關系，及其在預后評估中的價值。
　　結果：
　　1、Real-time PCR結果發(fā)現(xiàn)Pin1mRNA在34例HCC中的相對表達量（Relative quantity，RQ）為0.866±0.620，而相應癌旁正常肝組織的相對表達量1±0，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.359）。
　　2、Western Blot結果顯示，HCC中Pin1蛋白的平均表達量（1.3

4、22±0.977）高于相應癌旁肝組織（0.753±0.594），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）；HCC中DAPK1蛋白的表達量（0.523±0.435）低于相應癌旁肝組織（1.291±1.185），差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.019）；HCC中β-catenin蛋白的表達量（1.532±0.618）明顯高于相應癌旁肝組織（0.995±0.291）（P=0.021）。
　　3、免疫組織化學結果顯示，47.8％（88/184）的

5、HCC出現(xiàn)Pin1蛋白陽性，定位于胞質和（或）胞核，明顯高于癌旁組35.9%（66/184），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001），并且Pin1隨著腫瘤分化程度的降低，Pin1蛋白的表達逐漸升高（P=0.001）；DAPK1主要定位于胞質，在HCC的陽性率為31%（57/184），低于癌旁組的陽性率62.5%（115/184），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）；有77.7%(143/184)的HCC出現(xiàn)β-catenin異常表達（包

6、括胞膜缺失表達和胞質、胞核異位表達），明顯高于癌旁組52.7%(97/184)，差異具有統(tǒng)計學計學意義（P=0.003），同時β-catenin的異常表達腫瘤直徑存在正相關（P=0.034）。Spearman秩相關分析顯示，Pin1的表達與DAPK1呈負相關（r=﹣0.462，P<0.001），和β-catenin呈正相關（r=0.202，P=0.006），DAPK1的表達與β-catenin呈負相關（r=﹣0.255，P=0.001）

7、。
　　4、Kaplan-Meier和Cox生存分析顯示，HCC中Pin1和DAPK1的蛋白表達均和HCC患者的無瘤生存時間相關（P=0.017和P=0.012），Pin1蛋白表達、DAPK1表達是能夠反映肝癌患者無瘤生存期的獨立危險因素（P=0.025和P=0.002）；HCC中β-catenin的表達與HCC患者的總生存時間相關（P=0.027），β-catenin表達是能夠反映肝癌患者總生存期的獨立危險因素（P=0.016）