魚精蛋白工程化研究.pdf

1、魚精蛋白是一類存在于各類雄性動(dòng)物成熟精巢組織中的多聚陽(yáng)離子肽。魚精蛋白用作新型的食品防腐劑和藥物，證實(shí)具有耐熱、抗菌、安全和多種保健作用等優(yōu)點(diǎn)。但同時(shí)在提高魚精蛋白的耐酸性、增加抑制革蘭氏陰性菌能力和減少溶血方面需要繼續(xù)研究。這些研究取得的進(jìn)展，有助于發(fā)展魚精蛋白在乳品添加劑中的應(yīng)用，有助于研發(fā)新型抗菌素。
　　 本文旨在通過(guò)改變天然魚精蛋白的氨基酸序列，提高魚精蛋白的耐酸性、賦予和提高魚精蛋白抑制革蘭氏陰性菌能力以及在酸性條件

2、下協(xié)助提高酪蛋白的穩(wěn)定性。為魚精蛋白大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用提供更好的目的基因。
　　 本論文人工設(shè)計(jì)合成了一種魚精蛋白——將天然鮭魚精蛋白序列PRRRRSSSRPVRRRRRPRVSRRRRRRGGRRRR改變成PRRRRSSSRPVRRRRRPRVSSSRRRRGGRRRR。由此降低了天然魚精蛋白的兩個(gè)正電荷，增加了疏水性，新產(chǎn)生了一個(gè)與連續(xù)精氨酸殘基相鄰的絲氨酸簇，形成了相似于酪蛋白中的兩個(gè)局部序列（精氨酸左/右側(cè)連續(xù)出現(xiàn)絲氨酸）。

3、
　　 通過(guò)對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌，包括金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）和四聯(lián)球菌（Micrococcus tetragenus）以及革蘭氏陰性菌，包括大腸桿菌（Escherichia coli）和圓褐固氮菌（Azotobacter chroococcum）五種菌的抑制效果試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白對(duì)革蘭氏陰性菌大腸桿菌和圓褐固氮菌的最低抑菌濃度分別是250

4、μg/ml和500μg/ml，較天然魚精蛋白硫酸鹽對(duì)革蘭氏陰性菌的抑制效果稍有提高。同時(shí)新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌表現(xiàn)出了更好的抑制效果，尤其是對(duì)四聯(lián)球菌的抑制效果較之天然魚精蛋白硫酸鹽稍有提高，125μg/ml的添加量對(duì)其仍有良好的抑制效果。
　　 本文首次研究了添加魚精蛋白對(duì)牛奶體系穩(wěn)定性的影響，并且取得了較好的效果。將1000μg/ml、800μg/ml、500μg/ml、250μg/ml、125μg/ml五種不同

5、濃度梯度的新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白和天然鮭魚精蛋白硫酸鹽溶液各0.3 ml分別添加到35 ml新鮮牛奶中，用8％檸檬酸在低于20℃條件下調(diào)酸，結(jié)果顯示新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白較天然魚精蛋白硫酸鹽對(duì)牛奶耐酸穩(wěn)定性有少許提高，如果能夠降低魚精蛋白的使用成本，適當(dāng)?shù)亩嗵砑右恍?huì)有更好的效果。魚精蛋白對(duì)牛奶穩(wěn)定性影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，與我們前面的理論分析和設(shè)想正好吻合，正是我們前面對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能分析的直接的事實(shí)說(shuō)明。
　　 將1000μg/ml、

6、800μg/ml、500μg/ml、250μg/ml、125μg/ml五種不同濃度梯度的新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白和天然鮭魚精蛋白硫酸鹽溶液各0.3 ml添加到35 ml新鮮牛奶中，把牛奶在室溫下放置（環(huán)境溫度在12℃-20℃之間，時(shí)間為三月底到四月初），靜置觀察新鮮牛奶的存放天數(shù)，出現(xiàn)分層的先后順序。結(jié)果顯示：未加魚精蛋白的空白對(duì)照管6 h即可見分層，加入天然鮭魚精蛋白硫酸鹽溶液的樣品管可以放置12-15 h，加入新設(shè)計(jì)合成的魚精蛋白的樣品