以牛初乳為原料制備免疫調(diào)節(jié)乳制品.pdf

1、蛋白質(zhì)中含有許多活性成分，通過酶解或其他手段可釋放出來。以牛初乳為原料，分離酪蛋白、乳清蛋白及乳鐵蛋白等主要成分，分別水解，檢測水解物的免疫刺激指數(shù)，以刺激指數(shù)為指標確定水解條件，并將水解物與乳粉按比例混合，形成配方奶粉。實驗過程中，將乳清蛋白、酪蛋白在濃度分別為2％、4％、6％、8％，酶與底物比分別為1:30、1:60、1:90的條件下用胰蛋白酶水解。乳鐵蛋白在濃度分別為2％、4％、6％，酶與底物比分別為1:30、1:60、1:90的

2、條件下用胃蛋白酶進行水解。采用MTT法分別以濃度為10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml的乳清蛋白、酪蛋白、乳鐵蛋白以及三種蛋白的水解產(chǎn)物對脾淋巴細胞的免疫刺激作用進行檢測，結(jié)果表明：三種濃度下的水解產(chǎn)物對脾淋巴細胞的免疫刺激指數(shù)SI值明顯高于三種蛋白本身SI值。酪蛋白對脾淋巴細胞的SI值最高為2.53，酪蛋白水解產(chǎn)物在底物濃度6％，酶與底物比為1:30，1000μg/ml條件下SI值最高，為5.83；乳清蛋白對脾淋巴細胞

3、的SI最高值為：2.05，乳清蛋白水解產(chǎn)物在底物濃度8％，酶與底物比為1:30，1000μg/ml時SI值最高，為4.89；乳鐵蛋白對脾淋巴細胞的SI值最高為2.29，乳鐵蛋白水解產(chǎn)物在底物濃度6％，酶與底物比為1:30，1000μg/ml時SI值最高，為5.33。以免疫刺激指數(shù)作為指標，選擇以上三個條件為最優(yōu)水解條件。 將得到的最優(yōu)水解條件的產(chǎn)物與乳粉按以下比例混合做成乳品配方，在10mg/ml，100mg/ml濃度下進行免疫

4、檢測： (1)奶粉與乳鐵蛋白水解產(chǎn)物，酪蛋白水解產(chǎn)物，乳清蛋白水解產(chǎn)物分別按100g:1g混合，均在100mg/ml濃度下SI最高，分別為5.20，5.70，4.77； (2)依牛奶中三種蛋白比例成分添加水解產(chǎn)物，即酪蛋白水解產(chǎn)物：乳清蛋白水解產(chǎn)物：乳鐵蛋白水解產(chǎn)物為80％:19.5％:0.5％，添加蛋白水解產(chǎn)物的總量為6g，在100mg/ml濃度下SI最高，為3.90； (3)將嬰幼兒和中老年奶粉中分別添加6g

5、酪蛋白水解產(chǎn)物，均在100mg/ml濃度下SI最高，分別為4.30和4.50； (4)嬰幼兒奶粉和中老年奶粉，均在100mg/ml濃度下SI最高，為2.40和2.64； (5)嬰幼兒和中老年奶粉中分別摻入輔料，均在100mg/ml時SI最高，分別為2.39和2.47 (6)將(2)與(5)混合，進行免疫檢測，嬰幼兒配方和中老年配方均在100mg/ml時SI最高，分別為6.10和5.49； (7)固定乳鐵蛋