慢性低O-,2-高CO-,2-對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響和咖啡因的干預(yù)作用及其可能機(jī)制.pdf

1、目的：(1)觀(guān)察慢性低O2高CO<,2>對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響及咖啡因干預(yù)作用:(2)觀(guān)察各組大鼠海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元在電鏡下的超微結(jié)構(gòu)的改變;(3)檢測(cè)各組大鼠海馬和皮質(zhì)CREBrrIRNA,初步探時(shí)咖啡因?qū)β缘蚈2高CO<,2>大鼠模型空間學(xué)習(xí)記憶功能干預(yù)作用的可能機(jī)制. 方法：將清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠64只,體重180-220g隨機(jī)分為四組:正常對(duì)照組(NC組,n=16),低O2高CO<,2>4

2、周+飲用水組(HH組,n=16),低O2高CO<,2>4周+咖啡因0.1mg/ml溶液組(HCl組,n=16),低O2高CO<,2>4周+咖啡因0.3 mg/ml溶液組(HC2組,n=16),將后二組大鼠置于常壓低O<,2>高CO<,2>艙內(nèi),通過(guò)調(diào)節(jié)N<,2>來(lái)降低艙內(nèi)O<,2>濃度使其維持在9-11﹪,C02濃度為5.5-6.5﹪,每天8小時(shí),每周6天.對(duì)照組大鼠除吸入空氣外,其它條件與其余二組相同.實(shí)驗(yàn)四周后,從各組隨機(jī)取8只大鼠

3、,用戊巴比妥鈉(35 mg/kg體重)腹腔注射麻醉,采用右心導(dǎo)管法檢測(cè)肺動(dòng)脈平均壓(mPAP),頸總動(dòng)脈插管測(cè)頸動(dòng)脈平均壓(mCAP),分別稱(chēng)取右心窒(RV)和存心室加室間隔(LV+S)的重量,以RV/(LV+S)重量比作為評(píng)價(jià)右心室肥大指標(biāo).其余大鼠行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),結(jié)束后,即將大鼠斷頭,分離海馬和皮質(zhì).采用電鏡方法來(lái)觀(guān)察大鼠的海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化:采用RT-PCR方法觀(guān)察大鼠海馬和皮質(zhì)CREBmRNA的表達(dá)水平.

4、 結(jié)果：(1)HH組、HC1和HC2組大鼠的mPAP、RV/(Lv+S)均高于NC組(P均<0.01),在HH組、HCl及HC2組之間比較無(wú)顯著性差異(Jp>0.05);(2)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與NC組相比,HH組大鼠尋找平臺(tái)的平均逃避潛伏期延長(zhǎng)(P<0.01)、游泳總距離增加(Jp<001);與HH組大鼠相比,HCl組大鼠尋找平臺(tái)的平均逃避潛伏期及游泳總距離無(wú)明顯下降(P均>0.05):HC2組大鼠尋找平臺(tái)的平均潛伏

5、期減少(P<0.01)及游泳總距離明顯下降(Jp<0.05).(3)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示與NC組比較,HH組海馬(P<0.01)及皮層區(qū)CREBmRNA表達(dá)水平降低(P<0.05):與HH組比較,HCl組海馬及皮層區(qū)CREBmRNA表達(dá)無(wú)顯著性差異(P均>0.05),HC2組海馬CREBmRNA表達(dá)的明顯升高(P<0.05),皮層無(wú)顯著性差異(P>0.05).(4)透射電鏡發(fā)現(xiàn):HH組大鼠海馬及皮層出現(xiàn)神經(jīng)元凋亡和變性現(xiàn)象,而HC1

6、海馬及皮層神經(jīng)元改變較HH組輕,而HC2組海馬及皮層神經(jīng)元無(wú)明顯凋亡表現(xiàn).(5)Pearman相關(guān)分析顯示,大鼠海馬區(qū)CREBmRNA的吸光度值與平均逃避潛伏期呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.01),但是皮層區(qū)無(wú)類(lèi)似相關(guān)性. 結(jié)論：(1)慢性低O<,2>高CO<,2>肺動(dòng)脈高壓大鼠存在空間學(xué)習(xí)障礙,而每天飲用0.3mg/ml的咖啡因溶液能改善大鼠的空間學(xué)習(xí)障礙:每天飲用0.1mg/ml的咖啡因溶液對(duì)大鼠的空間學(xué)習(xí)并無(wú)明顯改善作用.(2)慢