孕期補充DHA對宮內(nèi)感染仔鼠腦組織S-100B、ROS及IL-1β表達的影響.pdf

1、目的:
　　通過制備宮內(nèi)感染致腦損傷的動物模型,研究孕期DHA干預(yù)對宮內(nèi)感染仔鼠腦組織中S-100B蛋白(S-100B)、活性氧(ROS)及白細胞介素-1β(IL-1β)表達的影響,探討S-100B、ROS及IL-1β與腦損傷的關(guān)系以及DHA在宮內(nèi)感染后對仔鼠腦組織的保護作用。
　　方法:
　　將30只確定第1天懷孕的雌性SD大鼠隨機分為:生理鹽水對照組(NS組)、脂多糖組(LPS組)及DHA干預(yù)組(DHA組),每組1

2、0只。DHA組自孕期第1天開始每天每只孕鼠給予DHA130mg灌胃至分娩,LPS組及NS組則同時間給予等容積的無菌生理鹽水灌胃至分娩,于孕期第17、18天連續(xù)2天給DHA組及LPS組孕鼠腹腔注射LPS,劑量為350ug/kg,而NS組注射等容積(0.6ml)的無菌生理鹽水。取各組孕20天、生后第1、3、7天(分別記作G20、P1、P3、P7)的仔鼠腦組織,以及各組孕鼠分娩時的胎盤組織,采用蘇木精-伊紅染色法(HE染色),在光鏡下觀察各組

3、孕鼠的胎盤組織及各組不同時間點仔鼠腦組織的病理改變;應(yīng)用S-P免疫組化法檢測各組不同時間點仔鼠腦組織中S-100B及IL-1β的表達情況;采用大鼠活性氧酶聯(lián)免疫分析試劑盒(ELISA試劑盒)檢測各組不同時間點仔鼠腦組織中ROS的含量。
　　結(jié)果:
　　1.孕鼠子宮及胎盤組織HE染色:LPS組孕鼠子宮和胎盤組織明顯充血、水腫,可見大量中性粒細胞浸潤;NS組子宮及胎盤組織細胞排列整齊,無明顯充血水腫,未觀察到明顯的炎性細胞;DH

4、A組介于LPS組及NS組之間。
　　2.仔鼠腦組織HE染色:LPS組仔鼠腦組織出現(xiàn)神經(jīng)細胞腫脹,甚至有局灶性出血,隨著時間的推移,白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)纖維走向紊亂,可見篩網(wǎng)狀改變,細胞數(shù)量減少;DHA組早期神經(jīng)細胞有輕度水腫,但無明顯局灶性出血,隨著時間的推移,白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維走向尚規(guī)則,未見明顯篩網(wǎng)狀改變;NS組腦組織神經(jīng)細胞無水腫,細胞數(shù)豐富,隨著時間點推移,白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維走向規(guī)則。
　　3.仔鼠腦組織中S-100B的表達:LPS

5、組腦組織中S-100B的表達在G20時達高峰,P1、P3、P7時漸下降,與NS組相比,在G20、P1、P3、P7時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);DHA組腦組織中S-100B的表達,與LPS組相應(yīng)時間點相比均明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),與NS組比較,在G20、P1、P3時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),P7時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　4.仔鼠腦組織中ROS的表達:LPS組腦組織中ROS的表達在

6、G20時達高峰, P1、P3、P7時漸下降,與NS組相比,在G20、P1、P3、P7時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);DHA組腦組織中ROS的表達,與LPS組相應(yīng)時間點相比均明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),與NS組比較,在G20、P1、P3時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),P7時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　5.仔鼠腦組織中IL-1β的表達:LPS組腦組織中IL-1β的表達在G20時達高峰,P1、P3

7、、P7時漸下降,與NS組相比,在G20、P1、P3、P7時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);DHA組腦組織中IL-1β的表達,與LPS組相應(yīng)時間點相比均明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),與NS組比較,在G20、P1、P3時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),P7時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.孕鼠腹腔注射LPS制造宮內(nèi)感染模型后,HE染色光鏡下觀察仔鼠腦組織中神經(jīng)細胞水腫,可見局灶性出血

8、,細胞數(shù)量減少,推測宮內(nèi)感染可導(dǎo)致仔鼠腦損傷。
　　2.與NS組相比,LPS組仔鼠腦組織中S-100B、ROS及IL-1β的表達明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),提示宮內(nèi)感染后大量炎癥因子及炎癥相關(guān)因子的釋放在腦損傷的發(fā)生、發(fā)展中可能起重要作用。
　　3.與LPS組相比,DHA組仔鼠腦組織的病理形態(tài)學(xué)改變減輕,而且腦組織中S-100B、ROS及IL-1β的表達減少,提示DHA在宮內(nèi)感染導(dǎo)致的腦損傷中起到一定的抗炎、