涼血化瘀方治療中心性滲出性脈絡膜視網(wǎng)膜病變臨床觀察及實驗研究.pdf

1、目的：
　　 通過臨床病例，觀察中藥涼血化瘀方治療中心性滲出性脈絡膜視網(wǎng)膜病變(centralexudative chorioretinophy，CEC)的療效。進一步通過動物實驗，觀察涼血化瘀中藥對脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)的影響，并初步探討其作用機理，為中藥涼血化瘀方用于臨床治療CEC提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 一、臨床病例觀察：
　　 對7

2、0例70眼確診的中心性滲出性脈絡膜視網(wǎng)膜病變患者服涼血化瘀方中藥治療，將70眼分為中藥組46眼，聯(lián)合組15眼，陳舊組9眼。服中藥3個月，總觀察時間9個月。觀察比較治療前后最佳矯正視力(best corrected vision acuity，BCVA)、熒光眼底血管造影(fundus fluorescein angiography，F(xiàn)FA)和光學相干斷層掃描(Optic coherenttomography，OCT)圖像。
　　

3、 二、動物實驗研究：
　　 1.建立CNV動物模型，并評價可行性。
　　 棕色挪威(brown Norway，BN)大鼠32只一眼行氪激光(659nm)眼底光凝，另一眼作空白對照。激光功率、光凝斑直徑和曝光時間分別為360mW、501μm及0.05s。光凝20點。分別在光凝后7，14，21，28d隨機選取7只大鼠行眼底照像、FFA檢查。隨機選取1只大鼠行脈絡膜血管鋪片檢查。眼球標本行組織病理切片光鏡、Ⅷ免疫組織化學染色觀

4、察。
　　 2.評價不同濃度涼血化瘀中藥對氪激光誘導BN大鼠CNV形態(tài)的影響，從中篩選最佳濃度。
　　 659nm激光誘導BN大鼠CNV模型同1，隨機分成空白對照組、高濃度、中濃度和低濃度中藥組4組，每組6只，每日不同濃度中藥灌胃。四組分別在光凝后7、14、21d隨機選取2只大鼠行眼底照像、FFA檢查。眼球標本行組織病理切片光鏡、Ⅷ免疫組織化學染色觀察。
　　 3.比較中濃度涼血化瘀中藥與曲胺耐德(triamci

5、nolone acetonide，TA)對氪激光誘導BN大鼠CNV形態(tài)的影響。
　　 659nm激光誘導BN大鼠CNV模型同1，隨機分成空白對照組(16只)，中藥組(16只)，曲胺耐德組(16只)?？瞻讓φ战M每日生理鹽水灌胃，中藥組每日中藥灌胃，曲胺耐德組術后第2d玻璃體腔內注射5μL(0.2mg)曲胺耐德。在光凝后7，14，21，28d每組隨機選取3只大鼠行熒光素眼底血管造影(FFA)檢查，檢查后處死，取眼球行HE染色，Ⅷ因子

6、相關抗原免疫組織化學檢測；同時，每組選取1只大鼠做脈絡膜血管鋪片檢查。
　　 4.評價涼血化瘀中藥及TA對氪激光誘導BN大鼠CNV中基質金屬蛋白酶—9(Matrixmetalloproteinase9，MMP—9)和基質金屬蛋白酶抑制劑(tissue inhibitor ofmetalloproteinase2，TIMP—2)表達的影響。
　　 659nm激光誘導BN大鼠CNV模型同1，隨機分成空白對照組，中藥組和TA組

7、各12只。分別在光凝后7，14，21，28d隨機選取3只大鼠處死，摘除眼球，行病理切片及免疫組織化學檢測MMP—9及TIMP—2蛋白在CNV組織中的表達。
　　 結果：
　　 一、臨床病例觀察：
　　 末次隨訪時，中藥組46眼中，視力平均提高0.21，較治療前有統(tǒng)計意義；視力≥4.7者33眼(71.7％)；視力提高≥2行的25眼(54.3％)，視力波動在1行以內者16只眼(34.8％)，視力下降≥2行的5眼(10

8、.9％)，較治療前視力明顯提高。病灶直徑、病灶面積，中央視網(wǎng)膜厚度與治療前相比無統(tǒng)計學意義上的改變，黃斑容積較治療前降低。FFA檢查發(fā)現(xiàn)：顯效(CNV閉合)34眼(73.9％)，有效(CNv部分閉合)7眼(15.2％)，進步(CNV小部分閉合)4眼(8.7％)，無效(CNV擴大)0眼，較治療前顯著改善。OCT檢查發(fā)現(xiàn)：CNV型別由治療前活動期38眼(82.6％)、中間期8眼(17.4％)，轉變?yōu)橛行?瘢痕期)38眼(82.6％)，進步(

9、中間期)6眼(13.1％)，無效(活動期)2眼(4.4％)，具有統(tǒng)計學意義。
　　 聯(lián)合組15眼中，視力平均提高0.12，視力分布及視力提高的情況較治療前無明顯改善，病灶直徑、病灶面積、中央視網(wǎng)膜厚度及黃斑容積與治療前相比均無統(tǒng)計學意義上的變化。FFA檢查發(fā)現(xiàn)：顯效(CNV閉合)13眼(86.7％)，有效(CNV部分閉合)1眼(6.7％)，無效(CNV擴大)1眼(6.7％)，較治療前顯著改善。OCT檢查發(fā)現(xiàn)：CNV型別由治療前活

10、動期7眼(46.7％)、中間期4眼(26.7％)、瘢痕期4眼(26.7％)均可出現(xiàn)，轉變?yōu)橛行?瘢痕期)13眼(86.7％)，進步(中間期)1眼(6.7％)，無效(活動期)1眼(6.7％)，具有統(tǒng)計學意義。
　　 陳舊組9眼，治療后，病人主訴視疲勞的癥狀減輕，視力平均提高0.11，視力提高≥2行者3眼(33.3％)，但是，與治療前相比無統(tǒng)計學差異。病灶情況與治療前相比無統(tǒng)計學差異。
　　 二、動物實驗研究：
　　

11、 1.659nm激光(360mW，50μm，0.05s)照射BN大鼠視網(wǎng)膜20點后，7～21d顯示FFA晚期熒光素滲漏及光鏡下CNV厚度逐漸增加，28d時FFA滲漏和CNV厚度開始減少。
　　 2.FFA顯示：光凝后7～21d，空白對照組CNV滲漏面積逐漸增大，而中藥組滲漏面積增加無明顯差異；至21d，中、低濃度中藥組滲漏面積明顯低于空白對照組和高濃度中藥組，以中濃度中藥組CNV滲漏面積最小。CNV厚度變化：空白對照組7～21d

12、逐漸增厚，至21d達到高峰；而中藥組至14d CNV厚度達到高峰，14～21d CNV厚度變薄，以中濃度中藥組CNV厚度最薄。
　　 3.FFA顯示：光凝后7～28d，空白對照組CNV滲漏面積逐漸增大，而中藥組滲漏面積略增加，TA組瘢痕著色明顯。CNV厚度：空白對照組逐漸增加，至21d達高峰，28d略有下降；中藥組CNV厚度逐漸增加，至14d達到高峰，21d時明顯變薄，28d再次增加；TA組7～14d時CNV逐漸變薄，至14d時

13、最薄，此后CNV再次增厚。Ⅷ因子相關抗原陽性反應物吸光度：空白對照組7～14d時逐漸增加，至14d達到高峰，此后下降；中藥組7d時達到高峰，此后下降；TA組亦是14d達到高峰，但峰值較空白對照組低，此后下降。脈絡膜血管鋪片CNV面積：空白對照組7～28d逐漸增大；中藥組7～14d達到高峰，14～21d下降，28d時再次增加；TA組7～14dCNV面積逐漸增加，21，28d時瘢痕明顯。
　　 4.空白對照組在光凝后7d MMP—9

14、達到高峰，此后逐漸下降;中藥組在光凝后14d達到高峰，但峰值低于空白對照組，此后逐漸下降；曲胺奈德組在光凝后7d達到高峰，峰值介于空白對照組和中藥組之間，此后逐漸下降，在14～21d出現(xiàn)平臺期。空白對照組在光凝后14d TIMP—2達到高峰，此后逐漸下降；中藥組在光凝后14d達到高峰，峰值高于空白對照組，此后逐漸下降；曲胺奈德組在光凝后14d達到高峰，峰值介于空白對照組和中藥組之間，此后下降。
　　 結論：
　　 一、臨

15、床病例觀察：
　　 中藥涼血化瘀方可以促進CEC中CNV閉合，可以促進經過西醫(yī)治療后仍有CNV滲漏的CEC患者CNV閉合，可能改善陳舊CEC患者的視疲勞癥狀。
　　 二、動物實驗研究：
　　 1.氪激光誘導BN大鼠的CNV模型是一種較為理想的模型，F(xiàn)FA及CNV厚度分析是CNV定量研究的有效手段。
　　 2.中濃度涼血化瘀中藥可以有效抑制氪激光誘導BN大鼠的CNV增生，防止CNV滲漏。
　　 3.