SPA-PAMAM-Au納米復合物的制備、表征及應用.pdf

1、金納米粒子以優(yōu)越的性能在生物分析中起到了重要作用，免疫金標記(IGS：Immuno-Gold Staining Method)是一種目前普遍應用的標記方法。IGS的不足和問題在于膠體金的制備對設備潔凈度要求很高，顆粒大小和分散性不易控制，制備很小粒徑的金納米顆粒相對困難，關于蛋白質吸附于膠體金顆粒表面的機理目前有爭議。因此，有必要研究一種新的能解決上述問題的金納米粒子合成體系。本論文以蛋白質作用機理明確的樹枝狀大分子聚酰胺胺(NH2-P

2、AMAM)作為模板來合成粒度可控的金納米粒子，利用在免疫學方面有獨特性能的金黃色葡萄球菌蛋白A包覆制備SPA-PAMAM-Au。 論文主要分為三部分：1)2.0代NH<,2>-PAMAM(G2.0 NH<,2>-PAMAM)的合成和精制；2)SPA-PAMAM-Au納米復合物的制備及表征；3)SPA-PAMAM-Au納米復合物對典型抗原的特異性染色實驗研究。 首先，使用發(fā)散法合成了PAMAM G2.0,應用色譜法對其進行

3、分析和分離。合成的PAMAM鑒定結果與同行所報導的理論分析及研究結果一致，色譜法分析的結果證實了發(fā)散法合成得到的PAMAM具有乙二胺等的報道，分離后得到的PAMAM G2.0純度較高． 其次，SPA-PAMAM-Au納米復合物制備試驗表明，在NH<,2>-AMAM G2.0的水溶液中，運用硼氫化鈉還原氯金酸，同時加入足量包覆的SPA，能夠很好地制備粒徑較小(～3nm)，粒度分布均勻，穩(wěn)定的，具有良好抗體結合性的SPA-PAMAM

4、-Au納米復合物。對合成過程中化學行為的系統(tǒng)研究表明，pH值是制備過程的重要影響因素，最小蛋白質包覆用量較合理。復合物光學性質的研究表明，SPA-PAMAM-Au納米復合物體系激發(fā)后均呈現(xiàn)了較強的藍色熒光發(fā)射。這表明SPA-PAMAM-Au納米復合物具有作為優(yōu)良異光學標記的特殊性能。 最后，斑點金免疫滲濾法實驗結果表明SPA-PAMAM-Au納米復合物能夠對癌胚抗原進行特異性染色，微量的抗原在膜上呈現(xiàn)可辨的紅色斑點。熒光測試表明