LeT-7a靶向HMGA2調控鼻咽癌侵襲轉移功能及機制研究.pdf

1、[目的]：
　　1.探討let-7a和HMGA2在鼻咽癌及正常鼻咽粘膜組織樣品的表達情況，以及它們表達與鼻咽癌患者臨床特征的聯(lián)系。
　　2、研究let-7a和HMGA2對鼻咽癌細胞的遷移及侵襲功能影響。
　　3、探討let-7a和HMGA2影響鼻咽癌細胞遷移及侵襲可能的分子機制。
　　[方法]：
　　通過qRT-PCR檢測48例鼻咽癌及鼻咽上皮組織let-7a和HMGA2的表達。在miRNA靶基因數(shù)據(jù)庫預測

2、let-7a調控HMGA2的3'-UTR位點，雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測let-7a對靶基因HMGA2的直接調控作用，通過qRT-PCR和Western Blot檢測let-7a與HMGA2的mRNA和蛋白水平的影響。Transwell遷移和侵襲實驗檢測let-7a和HMGA2對鼻咽癌細胞遷移和侵襲能力的影響。通過Western Blot檢測let-7a和HMGA2在鼻咽癌細胞中對侵襲相關蛋白的影響。
　　[結果]：
　　1.L

3、et-7a在鼻咽癌組織中低表達(P＜0.001)，并且其低表達與鼻咽癌患者的臨床分期(P=0.014)，T分期(P=0.009)，N分期相關(P=0.039)。
　　2.HMGA2在鼻咽癌組織中高表達(P＜0.001)，并且其高表達與鼻咽癌患者的臨床分期(P=0.024)，N分期相關(P=0.002)。
　　3.在48鼻咽癌患者組織樣本中，let-7a與HMGA2的表達呈負相關(r=-0.385，P=0.007)。
　

4、　4.通過miRNA數(shù)據(jù)庫預測HMGA2的3'UTR區(qū)域存在let-7a的結合位點，并且通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)證實let-7a直接與HMGA2的3'UTR區(qū)域結合，通過qRT-PCR和Western Blot發(fā)現(xiàn)，let-7a負性調控HMGA2的蛋白質表達，對其mRNA無影響。此外，HMGA2不能反向調節(jié)let-7a的表達。
　　5.在鼻咽癌細胞中，通過let-7amimics上調let-7a的表達能明顯抑制鼻咽癌細胞株的遷移和侵