耐高溫超氧化物歧化酶的超濾分離及性質(zhì)表征.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本論文將含嗜熱棲熱菌(T.thermophilus HB27)的SOD基因在大腸桿菌中進(jìn)行了高效表達(dá),通過發(fā)酵生產(chǎn)獲得了得到耐高溫的Mn-SOD。
　　 利用兩段超濾技術(shù)對(duì)Mn-SOD的分離工藝進(jìn)行了研究,所選用的超濾膜為截留分子量50 kDa的聚醚砜膜和100 kDa的再生纖維素膜,獲得的最佳超濾分離條件為:100 mMNaCl+50 mM磷酸鈉緩沖溶液(pH6.0),攪拌速率900 rpm,流速13.3 L/m2h。經(jīng)過超濾

2、分離之后,SOD回收率為86％,純度為93％,蛋白活性為1,417.5 U/mg。
　　 由Mn-SOD的表征結(jié)果可知,該SOD的類型為Mn-SOD,等電點(diǎn)為pI6.2,分子量為96 kDa,單亞基分子量為24 kDa,是四聚體結(jié)構(gòu);該SOD穩(wěn)定的pH范圍為pH5.0-7.0,最適作用溫度為80℃,最適pH值為5.0;該酶在80℃和90℃時(shí)比較穩(wěn)定,在100℃時(shí)處理60 min,酶活剩余仍為57％;K+、Fe2+、Ni2+、Hg

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