基于膠體金免疫層析技術(shù)的視黃醇結(jié)合蛋白檢測試劑的制備和臨床驗證.pdf

1、自從人類跨入21世紀(jì)以后，伴隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展人們的生活在發(fā)生著巨大的改變。納米科技的發(fā)展不僅帶動了許多其他學(xué)科的發(fā)展，同時也產(chǎn)生了很多新興的交叉學(xué)科。納米技術(shù)與生命科學(xué)的結(jié)合所產(chǎn)生的納米生物技術(shù)是目前世界上的研究熱點課題，且是未來產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的一個前途光明的方向。膠體金免疫層析方法是一種將膠體金標(biāo)記、免疫檢測和層析分析技術(shù)等多種方法有機(jī)結(jié)合在一起的固相標(biāo)記免疫檢測技術(shù)，其特點是靈敏、便捷、安全、低成本等。
　　 視黃醇結(jié)合蛋

2、白是人血液循環(huán)中維生素A的特異性轉(zhuǎn)運蛋白，他的功能是通過反式視黃醇的形式將維生素A從肝臟轉(zhuǎn)運到肝臟之外的其他組織。腎臟對多種維生素的代謝調(diào)節(jié)有著十分重要的作用，一般情況下維生素在通過腎小管濾過時被重新吸收。如果腎小管功能發(fā)生異常，重吸收作用就會發(fā)生異常變化，尿液中RBP的濃度會顯著上升。目前RBP被公認(rèn)為是一個很好的腎小管損傷的早期診斷標(biāo)志物，RBP的檢測已被廣泛用于臨床腎臟病的診斷中。本文致力于制備一種膠體金免疫層析法的視黃醇結(jié)合蛋白

3、檢測試劑，為腎臟病的診斷提供一種快速、簡便且廉價的檢測手段，讓腎臟病的早期篩查可以得到大規(guī)模的普及。
　　 (1)采用膠體金免疫層析技術(shù)制備視黃醇結(jié)合蛋白檢測試劑。實驗對檢測試劑的制備進(jìn)行了摸索，闡述了膠體金免疫層析法視黃醇結(jié)合蛋白檢測試劑的制備方法；對試劑進(jìn)行了功能性試驗，對檢測試劑的性能進(jìn)行了全面的評估。實驗結(jié)果表明，該檢測試劑靈敏度在300ng/mL，特異性、重復(fù)性以及批間差良好，試劑在37℃條件下可穩(wěn)定20天，相當(dāng)于常溫

4、條件下有效期2年。
　　 (2)對制備好的視黃醇結(jié)合蛋白檢測試劑進(jìn)行臨床驗證試驗。對本試劑和已批準(zhǔn)上市的對照試劑盒(上海太陽生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的ELLISA法RBP含量測定試劑盒)進(jìn)行對比試驗，分析本品與已該產(chǎn)品在檢測結(jié)果上的相關(guān)性。兩種檢測方法的診斷結(jié)果的一致性良好(市一醫(yī)院：K＝0.9070，95％CI：0.8277～0.9863，P<0.01；市六醫(yī)院：K=0.9391，95％CI：0.8714～1.000，P<0.01