植物乳桿菌發(fā)酵劑的制備及抗氧化活性的研究.pdf

1、本文對植物乳桿菌發(fā)酵劑制備的關(guān)鍵技術(shù)進行了研究，篩選了增殖培養(yǎng)基和高效凍干保護劑，優(yōu)化了植物乳桿菌增殖培養(yǎng)、細胞濃縮分離等工藝條件，在此基礎(chǔ)上，評價了其產(chǎn)物的抗氧化活性功能，旨在探討植物乳桿菌的生物活性作用機理及其功能成分和量效關(guān)系，為開發(fā)含有植物乳桿菌的功能性乳制品提供理論和技術(shù)基礎(chǔ)。實驗確定了植物乳桿菌的最佳增殖培養(yǎng)基組成為:11％脫脂乳、0.5％乳糖、0.5％胰蛋白胨、0.8％酵母浸粉、8％新鮮乳清、0.8％復(fù)合維生素、1％Na2

2、HPO4-KH2PO4。在此培養(yǎng)基中37℃恒溫培養(yǎng)12h，活菌數(shù)達到1.53×109cfu·mL-1，較不添加復(fù)合生長因子培養(yǎng)基提高了5.3倍。將植物乳桿菌發(fā)酵液離心，選擇最佳離心條件:轉(zhuǎn)速為4000r/min，離心時間為20min，添加復(fù)合保護劑10％海藻糖、11％脫脂乳、4％谷氨酸鈉制成菌懸液，經(jīng)過真空冷凍干燥，凍干存活率達到78.8％。
　　 本研究探討了植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌完整細胞、無細胞提取物、滅活菌體及凍干菌體

3、的抗氧化活性。測定了兩種植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌的DPPH清除能力、羥自由基清除能力、超氧陰離子清除能力、抗脂質(zhì)過氧化能力、還原能力和對金屬離子的螯合能力，對比其抗氧化活性的差別。結(jié)果表明，植物乳桿菌的抗氧化活性優(yōu)于保加利亞乳桿菌，菌體濃度為109cfu·mL-1的植物乳桿菌和保加利亞乳桿菌無細胞提取物的DPPH自由基清除率最高為47.8％和41.1％。清除羥自由基實驗表明，濃度為109cfu·mL-1的植物乳桿菌各提取物清除羥自由基

4、能力與同體積的1mmol·L-1抗壞血酸相當(dāng)。清除超氧陰離子實驗中，植物乳桿菌無細胞提取物清除率達到了48.7％。植物乳桿菌無細胞提取物和完整細胞還原活性分別相當(dāng)于307±5.4μmol·L-1和263±4.3μmol·L-1的L-半胱氨酸。對亞鐵離子和銅離子螯合能力分別為53.6％、83.1％和28.1％、43.7％。這幾項結(jié)果表明，無細胞提取物表現(xiàn)出較強的抗氧化活性，說明乳酸菌胞內(nèi)物質(zhì)是菌產(chǎn)生抗氧化活性的主要因素，為綜合利用植物乳桿

5、菌提供了有利依據(jù)。通過動物實驗，探討植物乳桿菌對D-半乳糖致衰小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。6周后測定小鼠血清及肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)的活性。結(jié)果顯示:與衰老模型對照組相比，正常組及灌胃植物乳桿菌的小鼠抗氧化活性都有顯著性提高。其中，灌胃植物乳桿菌無細胞提取物組的小鼠相對于衰老模型組的小鼠，其血清和肝臟的SOD、GSH-Px、