ROP9與ABI2互作在ABA信號通路中的功能分析.pdf

1、分類號學校代碼10542密級學號2Q!!Q21壘l遜ROP9與ABl2互作在ABA信號通路中的功能分析ThefunctionanalysisoftheinteractionbetweenROP9andABl2inABAsignalingpathwav1一一一—，指導教師姓名、職稱鑾盤塾援奎盔屋熬援湖南師范大學學位評定委員會辦公室二零一四年五月對ROP9的T-DNA插入突變體salk111788的植株進行了鑒定，并獲得了純合的突變植株。但

2、通過半定量分析發(fā)現(xiàn)其中ROP9的表達水平并未降低，反而與野生型相比有所升高，因此說明其不是有效的ROP9的T-DNA插入突變體。還利用擬南芥轉基因技術將ROP9-pEGAD導入植株中，獲得了ROP9的過表達轉基因植株，并利用半定量分析確定了ROP9過表達植株中ROP9表達水平發(fā)生了上調。將ROP9的RNAi轉基因植株與過表達植株，種植于含有ABA的MS上，觀察其萌發(fā)率及生長狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)在ABA的處理下，ROP9的RNAi轉基因植株的萌發(fā)率

3、要明顯低于野生型，而過表達植株的萌發(fā)率要高于野生型；而未處理下，ROP9RNAi轉基因植株與過表達植株的萌發(fā)率與野生型沒有明顯的差別。同時通過原核表達出ROP9、CAROP9、DNROP9與ABl2蛋白，并進行純化。將這些蛋白與ABl2一起孵育，然后進行磷酸酶活性的測定，發(fā)現(xiàn)正常態(tài)的ROP9與激活的CAROP9對ABl2的磷酸酶活性具有顯著的激活作用。綜合上述結果，說明ROP9通過激活ABl2的磷酸酶活性與ABl2相互作用，并在ABA信