固定化蛋白酶的制備及其在毛織物防氈縮整理中的應(yīng)用.pdf

1、固定化酶因具有提高酶的穩(wěn)定性、反應(yīng)后易與產(chǎn)物分離及可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)，在生物、化工、食品、醫(yī)藥等方面有廣泛的應(yīng)用前景。在紡織印染行業(yè)，特別是羊毛織物的防氈縮整理，目前仍主要采用氯化／樹脂法和蛋白酶法處理，固定化酶法則鮮為報(bào)道。本論文以磁性殼聚糖微球、pH敏感相分離高分子材料為載體分別對(duì)紡織用蛋白酶進(jìn)行固定化研究，考察了固定化蛋白酶的制備條件、固定化蛋白酶的性質(zhì)、催化動(dòng)力學(xué)參數(shù)以及其在羊毛防氈縮整理中的應(yīng)用。
　　 采用乳化交聯(lián)法合

2、成了磁性殼聚糖復(fù)合微球，以其為載體，戊二醛為交聯(lián)劑制備了磁性殼聚糖微球固定化蛋白酶，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定了最佳制備工藝條件。研究了磁性固定化蛋白酶的穩(wěn)定性、重復(fù)使用性和催化動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并將其應(yīng)用在毛織物針織物防氈縮整理中。結(jié)果表明：磁性殼聚糖微球呈規(guī)則球狀，弱磁性，粒徑在30-50μm范圍內(nèi)。磁性固定化蛋白酶最佳制備條件：EDC（1-乙基-（3-二甲氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽）濃度為0.25％(w/v)，戊二醛濃度為2.0％(v/v),蛋白

3、酶緩沖溶液(pH=7.5)濃度為0.4％(v/v)，固定化溫度為40℃，固定化時(shí)間為90min。此條件下制備的固定化蛋白酶固載率為82.4％,酶活回收率可達(dá)65.8％。磁性固定化蛋白酶的耐熱、耐酸堿和儲(chǔ)存穩(wěn)定性均優(yōu)于游離蛋白酶；經(jīng)使用30次后，磁性固定化蛋白酶保留原酶活力82.0％左右。蛋白酶經(jīng)磁性殼聚糖微球固定化后，Km值增大2.76倍，表明酶與底物親和力變小。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定了磁性固定化蛋白酶在羊毛防氈縮整理的最優(yōu)工藝，整理后織物的

4、氈縮率為7.1％,失重率為6.4％，強(qiáng)力損失率為8.2％；等酶量的游離蛋白酶整理后織物氈縮率為6.9％，失重率為11.7％，強(qiáng)力損失率為19.1％。
　　 采用pH敏感相分離高分子Eudragit S-100為載體，制備了pH敏感相分離固定化蛋白酶，單因素實(shí)驗(yàn)確定了最佳制備條件。研究了固定化蛋白酶的穩(wěn)定性、重復(fù)使用性和催化動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并將其應(yīng)用在毛織物防氈縮整理中。結(jié)果表明：pH敏感相分離固定化蛋白酶最佳制備條件：Eudragi

5、t S-100濃度為2.0％(w/v)，EDC濃度為0.2％(w/v)，蛋白酶緩沖溶液(pH=7.5)濃度為1.0％(v/v)，固定化溫度為30℃，固定化時(shí)間為90min。此條件下制備的固定化酶固載率為89.6％，酶活回收率可達(dá)80.7％。pH敏感相分離固定化蛋白酶的耐熱、耐酸堿和儲(chǔ)存穩(wěn)定性均優(yōu)于游離蛋白酶；經(jīng)使用30次后，固定化酶活力仍保留原酶活力77％左右。蛋白酶經(jīng)Eudragit S-100固定化后，Km值增大1.94倍，表明酶與