一種基于魚膠原的抗菌止血醫(yī)用敷料的制備及其性能研究.pdf

1、膠原蛋白具有止血效果、能夠促進細胞生長、具有生物可降解性，因而可以用來制備止血敷料。出血傷口易感染病菌，若向該敷料中添加具有廣譜抗菌效果的抗菌劑Ag4O4，則可有效防止傷口被微生物感染?，F(xiàn)在實際應用的膠原蛋白大都來自于陸生動物，然而近年來由于瘋牛病、口蹄疫等傳染病的發(fā)生使人們對于陸生動物來源的膠原蛋白的安全性產生了懷疑，同時由于陸生動物在信仰伊斯蘭教的地區(qū)還受到限制，因此研究魚類膠原蛋白的提取和應用顯得非常重要。青魚是我國淡水養(yǎng)殖的“四

2、大家魚”之一，是重要的經濟魚類，易于飼養(yǎng)，產量高。此外，青魚體長，含有的魚皮、魚鱗、魚鰾較多，膠原蛋白含量豐富。出于此目的，本論文展開了以下研究：
　　 1.以青魚為原材料研究了膠原的提取、表征和應用。首先探索了從青魚的魚皮、魚鱗、魚鰾中分離純化得到膠原蛋白的方法，以酸法和胃蛋白酶法提取相應得到酸溶性膠原(ASC)和酶溶性膠原(PSC)，確定提取方案-從青魚魚鰾中以酶法分離純化得到膠原，然后優(yōu)化該方案，最后膠原的提取率為8.67

3、％。為了有效地利用膠原，還對該膠原進行了表征，通過核磁氫譜、紅外光譜、SDS-PAGE電泳可以看出提取的膠原純度較高，具有三螺旋結構，分子量約為100kDa～200kDa，通過差示掃描量熱法可以看出其熱變性溫度為40～60℃，具有代替陸生動物膠原的潛力。
　　 2.研究了靜電紡絲制備膠原纖維敷料的工藝及紡絲前后膠原蛋白性質的變化。通過大量的實驗發(fā)現(xiàn)，當膠原濃度為5%(質量分數，溶劑為六氟異丙醇)，紡絲電壓為20kV，接收距離為1

4、2cm，紡絲原液的流速為0.6ml/h時，可得到粗細均勻的平均直徑僅100nm的膠原纖維。靜電紡絲并用25%的戊二醛蒸汽交聯(lián)后，膠原纖維具有一定的疏水效果，而膠原的其他性質基本無改變。說明靜電紡絲是一種制備生物納米纖維的良好方法。
　　 3.通過軟化學方法制備得到Ag4O4，對比制備條件的影響設計出最佳實驗方案，并對產物進行了表征。實驗發(fā)現(xiàn)，獲得的Ag4O4的粒徑為微納米級別，是Ag2O和Ag2O3的混合物。由于Ag4O4中的A

5、g+/Ag3+電位不平衡，使其對表面裸露-N基(NH，-NH2)和-S基(S-S，-SH)的蛋白質具有親和性，能與-N基和-S基發(fā)生熱力學吸附并觸發(fā)氧化還原反應，從而產生致使蛋白質構象改變的電殺作用和鰲合作用。定性和定量的抗菌測試顯示，0.1% Ag4O4對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌及銅綠假單胞菌具有顯著的抗菌效果。
　　 4.最終產品的制備及性質研究。通過化學沉降法將Ag4O4添加到膠原纖維中去，結合有抗菌劑的膠原纖