豬皮膠原多肽結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、論文使用凝膠層析(GFC)、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及毛細(xì)管電泳(CE)三種方法對豬皮膠原多肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析研究，測定了多肽的分子量和分子量分布、分子中的氨基-羧基數(shù)量比及其等電點(diǎn)等結(jié)構(gòu)特性。膠原多肽由豬革生產(chǎn)中的含鉻革屑在堿性蛋白酶催化水解下得到，論文還對含鉻革屑的水解進(jìn)行了研究。 本文建立的含鉻革屑的水解條件為：水：200.00mL；革屑：20.00g；酶：0.60mL；起始pH：11.00；反應(yīng)時間：

2、6h。凝膠層析柱填料選用SephadexG-100，測得多肽分子量主要分布在兩個區(qū)間：70,000～50,000D和30,000～20,000D，平均分子量分別為58,608D和24,580D。SDS-PAGE測得多肽分子量主要分成兩個蛋白條帶：第一條帶分子量約為70,000～50,000D，第二條帶分子量約為30,000～20,000D，平均分子量分別為58,895D和22,364D；根據(jù)毛細(xì)管區(qū)帶電泳理論，我們推導(dǎo)出多肽分子中氨基-

3、羧基數(shù)量比的計算公式為：q1/q2=tap1/1-teo1/1/tap2/1-teo2/1×1+10pH1-pK1/1+10pK2-pH2測得豬皮膠原多肽的氨基-羧基數(shù)量的比值約為0.95：1，比理論值的1.13：1低16％，等電點(diǎn)約為8.00，比豬皮膠原蛋白的7.8高2.7％。 GFC、SDS-PAGE是蛋白質(zhì)、多肽分子量測定的常規(guī)手段，論文借鑒其它蛋白質(zhì)的測試條件，開展對豬皮膠原多肽分子量和分子量分布的分析研究，并對含鉻革屑

4、水解條件與多肽分子量的對應(yīng)關(guān)系進(jìn)行了初步探討；毛細(xì)管電泳依據(jù)分子的荷質(zhì)比實現(xiàn)組分的分離，據(jù)此，論文通過多肽的電泳速度與電滲流速度的比較，測定了其等電點(diǎn)，并通過多肽在等電點(diǎn)兩側(cè)pH值下電泳時間的差異，計算分子中的氨基-羧基比，給出了豬皮膠原多肽電荷特性、側(cè)鏈官能團(tuán)數(shù)量等分子精細(xì)結(jié)構(gòu)信息。論文研究結(jié)果將為蛋白質(zhì)、多肽等兩性分子的深層結(jié)構(gòu)分析研究提供理論指導(dǎo)和新的實驗方法，研究具有開拓性。論文研究結(jié)果對皮膠原蛋白的資源化利用具有重要意義。