東方百合的花芽分化機理研究.pdf

1、本研究以東方百合作為試驗材料，克隆百合花芽分化過程中的lfy基因，為全面了解百合花芽分化過程中的分子機制奠定基礎。以百合花芽分化過程五個時期的百合鱗莖為研究材料，采用雙波長法分別測定百合內(nèi)層鱗莖、中層鱗莖和外層鱗莖中的直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉的含量；同時對這五個時期的內(nèi)層鱗莖、中層鱗莖和外層鱗莖中的淀粉粒進行掃描并研究淀粉粒的變化情況。主要研究結(jié)果如下：
　　1.獲得了百合幼嫩花芽RNA的最佳提取方法。利用CTAB法、Trizo

2、l法、Trizol改良法以及RNA提取試劑盒等四種RNA的提取方法提取百合花芽的RNA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)僅RNA提取試劑盒方法提取的RNA質(zhì)量和完整性最好。
　　2.運用PCR技術克隆出百合的lfy基因。設計lfy基因的特異引物，提取百合幼嫩花芽的RNA，進行RT-PCR，結(jié)果在830bp左右出現(xiàn)了目的條帶。通過切膠回收、連接轉(zhuǎn)化、挑取單克隆和測序，利用NCBI和DNAMAN軟件對該基因序列與已知的百合Lilfy1基因序列blast比對，

3、結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該基因與百合的Lilfy1基因的同源性高達94％。說明本研究所獲得的基因即為要克隆的東方百合lfy基因。
　　3.東方百合lfy基因在花芽分化的五個時期中，在花原基分化期的表達量最高，其次在花被原基分化期有表達，而在其他三個時期中均沒有表達。
　　4.測定了東方百合內(nèi)層鱗片、中層鱗片和外層鱗片中的直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉的含量。發(fā)現(xiàn)在東方百合鱗莖中不同部位的鱗片中的三種淀粉含量隨著花芽分化過程的進行逐漸降低，并且