適量積累二氧化硫啤酒酵母菌種的選育.pdf

1、對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的6株啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）進(jìn)行基礎(chǔ)發(fā)酵性能分析，并對(duì)各株啤酒酵母進(jìn)行發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，從中選出了凝聚性強(qiáng)、發(fā)酵度適中、發(fā)酵速度較快并且S02產(chǎn)量相對(duì)較高的SY-8作為出發(fā)菌株。
　　 對(duì)SY-8在不同條件下進(jìn)行啤酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)并測(cè)定發(fā)酵產(chǎn)生的S02及H2S，發(fā)現(xiàn)不同麥汁初始pH值、麥汁中氨基酸、鹽類含量對(duì)啤酒發(fā)酵中硫化物產(chǎn)量均有不同程度的影響。pH值6.0時(shí)S02產(chǎn)量達(dá)最大值，各種鹽類及氨

2、基酸添加量在0.05％之內(nèi)時(shí)，S02產(chǎn)量與添加濃度基本成正比，其中添加硫化鈉濃度為0.02％時(shí)S02產(chǎn)量可高達(dá)基本發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的3倍多，半胱氨酸添加濃度為0.02％時(shí)S02產(chǎn)量為基本發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的1.45倍。
　　 利用硫酸二乙酯(DES)對(duì)出發(fā)菌株SY-8進(jìn)行化學(xué)誘變，以不同硫源鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行初篩，發(fā)酵實(shí)驗(yàn)后測(cè)定S02復(fù)篩，得到適量高產(chǎn)S02的啤酒酵母突變株12株。對(duì)12株突變株進(jìn)行基礎(chǔ)發(fā)酵性能及遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，最終選定MS-10為誘

3、變最優(yōu)菌株，其S02生成量25.32mg.L-1，H2S生成量13.46ug.L-1，與出發(fā)菌株SY-8相比其發(fā)酵性能更優(yōu)，且S02產(chǎn)量提高了30％以上。
　　 采用RAPD技術(shù)，對(duì)酵母菌株SY-8及MS-10進(jìn)行遺傳物質(zhì)分析，發(fā)現(xiàn)電泳圖譜存在條帶差異，將其回收測(cè)序得到啤酒酵母未知功能序列GQ250856。對(duì)兩株啤酒酵母全蛋白進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩株酵母在蛋白質(zhì)水平上沒有顯著差異。由此判斷突變株MS-10與出發(fā)