雜色云芝菌生產(chǎn)漆酶的發(fā)酵條件優(yōu)化及漆酶的應用研究.pdf

1、漆酶作為一種可以在食品、造紙、環(huán)保等多個工業(yè)領域中發(fā)揮作用的生物酶,其應用前景非常好。但是漆酶的產(chǎn)量較低,無法充分發(fā)揮其優(yōu)勢。
　　 因此,首先對雜色云芝菌(Coriolus versicolor)純種培養(yǎng)生產(chǎn)漆酶的發(fā)酵條件進行了優(yōu)化,獲得培養(yǎng)基(/L)最優(yōu)組合:馬鈴薯200 g,葡萄糖10g,麩皮10g,黃豆粉7g,沒食子酸0.085g(0.5mmol),CuSO4·5H2O1.873g(0.75mmol),MgSO4·7H2

2、O1.5g,KH2PO43g,接種量2.8％,酶活最高可達10.511U/mL,比優(yōu)化前的1.019U/mL提高了9.32倍采用雙菌種混合培養(yǎng)方法,當雜色云芝發(fā)酵3天后加入1.4%(V:V)皺褶假絲酵母,酶活最高可達14.606U/mL,比對照組(10.511U/mL)提高約38.9%。
　　 研究了純種培養(yǎng)和雙菌種培養(yǎng)產(chǎn)漆酶的部分酶學性質(zhì),均以2,2’-聯(lián)氨-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺鹽(即ABTS)為底物。試驗

3、結(jié)果表明,最適溫度均為為55℃,20-45℃和pH值4.0、pH值5.5時,純種培養(yǎng)產(chǎn)漆酶穩(wěn)定性較好;兩種漆酶活力隨pH值的降低而升高,變化趨勢相似;對于純種培養(yǎng)產(chǎn)漆酶乙酸-乙酸鈉緩沖液對其活力影響較大,Co2+、Fe2+、Mn2+、I-在一定濃度下明顯抑制其活力,Zn2+、Cu2+、Mg2+、SO42-則具有明顯促進作用。
　　 漆酶-介體系統(tǒng)對靛藍脫色的影響試驗表明,適宜的反應條件為:總反應體系70mL,靛藍50mg/L(5

4、0mL),酶液20U,pH值5.0,反應溫度45℃,在此條件下,香草醛(7.0μmol)比ABTS(6.0μmol)效果更好。香草醛(2.0μmol)和ABTS(1.2μmol)聯(lián)合做介體時相對更有效。對于其他不能直接脫色或脫色效果較差的反應體系,可以通過加入某些介體來高效促進反應。
　　 將漆酶和纖維素酶應用于靛藍牛仔布水洗試驗中,發(fā)現(xiàn)當纖維素酶單獨作用時,剝色效果明顯,但返沾色現(xiàn)象較為嚴重;當漆酶單獨作用時,剝色效果相對較差