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文檔簡介
1、6-磷酸海藻糖合成酶在海藻糖代謝過程中發(fā)揮重要作用,在 UDP-葡萄糖(UDPG)與葡萄糖-6-磷酸作為底物的參與下,能夠?qū)DP-葡萄糖(UDPG)上的葡萄糖基轉(zhuǎn)移到葡萄糖-6-磷酸上,使產(chǎn)生海藻糖-6-磷酸。本實(shí)驗(yàn)我們對嗜熱古菌Thermoplasma acidophilum所編碼的6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)的性質(zhì)進(jìn)行一系列的研究。
我們首先以thermoacidophilic archaeon Thermopla
2、sma acidophilum所編碼的TPS基因序列TA1210為依據(jù),克隆、構(gòu)建質(zhì)粒并將其導(dǎo)入到大腸桿菌體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),然后通過金屬離子親和層析以及分子篩層析純化獲得較純蛋白收集液,然后通過相關(guān)實(shí)驗(yàn)對其酶學(xué)特點(diǎn)做了探究。
taTPS可以利用UDPG、ADPG、GDPG當(dāng)成糖基供體,以不同磷酸化單糖為糖基受體。研究發(fā)現(xiàn)taTPS最適催化溫度和pH是60℃和6,并且具有一定的溫度穩(wěn)定性以及酸堿穩(wěn)定性。研究還發(fā)現(xiàn):二價(jià)金屬離子對酶的
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