磁性氧化硅復(fù)合微球表面氨基的定量檢測(cè)方法研究.pdf

1、本課題研究的目的是要建立一種應(yīng)用于氧化硅包覆磁球表面微量氨基密度的檢測(cè)方法。在對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行充分調(diào)研的基礎(chǔ)上，選擇了熒光胺法以及ITL/BCA法作為主要研究的兩種方法。
　　 本文首先以實(shí)驗(yàn)室制備的氨基改性氧化硅磁球?yàn)榇龣z測(cè)物，建立基于氧化硅磁性微球的熒光胺定量檢測(cè)表面氨基基團(tuán)密度的方法。通過(guò)實(shí)驗(yàn)選擇反應(yīng)體系pH值為8.0，標(biāo)準(zhǔn)溶液與熒光胺反應(yīng)時(shí)間為20min，磁性微球樣品水解反應(yīng)60h，優(yōu)化并建立了基于氧化硅磁性微球表面氨基的熒光

2、胺定量檢測(cè)方法，對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行批內(nèi)、批間偏差的評(píng)價(jià)，并且對(duì)自制的氧化硅磁性微球表面氨基進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)的批間誤差小于25％，批內(nèi)誤差小于10％。標(biāo)準(zhǔn)曲線的最低檢出值為0.074mmol/g。此方法基本可以滿足低密度氨基樣品的檢測(cè)需要，并且具備較好的準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性。
　　 其次，以本實(shí)驗(yàn)室制備的氨基改性氧化硅磁球?yàn)榇龣z測(cè)物，建立了基于氧化硅磁性微球的ITL/BCA定量檢測(cè)固相載體表面氨基基團(tuán)方法。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，選擇樣品反應(yīng)最佳

3、溫度為60℃，反應(yīng)時(shí)間為1h，ITL試劑最佳濃度為40mM，研究了使用BCA試劑與MicroBCA試劑對(duì)于反應(yīng)的差別，優(yōu)化并建立了基于氧化硅磁性微球表面氨基的熒光胺定量檢測(cè)方法，對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行批內(nèi)、批間偏差的評(píng)價(jià)，并且對(duì)自制的氨基氧化硅磁性微球、氨基二氧化硅微球和PEI接枝二氧化硅微球表面氨基進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果顯示，此方法基本可以滿足低密度氨基樣品的檢測(cè)需要，并且具備較好的準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性。
　　 最后，在已經(jīng)建立的ITL/BCA方法