部分南海微藻的分子鑒定及富油藻株的篩選.pdf

1、南海水域遼闊，地質(zhì)、氣候等環(huán)境條件復(fù)雜，蘊(yùn)含豐富的生物資源，是能源微藻資源庫(kù)。本研究以從南海分離到的微藻細(xì)胞為對(duì)象，利用分子生物學(xué)手段進(jìn)行分類鑒定，通過測(cè)定其生長(zhǎng)指標(biāo)及含油量，篩選出生長(zhǎng)快速、油脂含量高的藻種，為微藻生物柴油的生產(chǎn)提供了更多的原材料。
　　具體的工作內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　1.通過交互使用微吸管法、96孔板稀釋法、水滴法、平板法，從141個(gè)水樣中分離純化出57株純種微藻，獲得了豐富的藻種資源。其中稀釋法效果最好

2、，但得到的藻種種類較單一，一般為優(yōu)勢(shì)藻種。
　　2.利用18S核糖體RNA基因(rDNA)對(duì)分離純化得到的57株純種藻細(xì)胞進(jìn)行分子鑒定，共鑒定出11種不同種類的藻細(xì)胞，其中8種被鑒定到屬，1種被鑒定到科，2種被鑒定到目。鑒定結(jié)果如下：1、5、7、11、21、29、59、72號(hào)藻株分別為Bodo屬、Pavlova屬、Cafeteria屬、Paraphysomonas屬、Chlamydomonas屬、Pycnococcus屬、Psam

3、modictyon屬、Caecitellus屬，55號(hào)藻株屬于Bacillariaceae科，54號(hào)藻株屬于Chlorellales目，109號(hào)藻株屬于Chromulinales目。這一結(jié)果驗(yàn)證了分子鑒定在微藻分類鑒定中的高效性。
　　3.對(duì)11株已鑒定的藻株進(jìn)行生理生化分析，通過光密度法測(cè)定藻細(xì)胞濃度，觀察藻細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，54號(hào)和109號(hào)藻株從進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期到指數(shù)生長(zhǎng)期結(jié)束生長(zhǎng)明顯比其他藻株迅速；54、55、109、1號(hào)藻株比生

4、長(zhǎng)速率相對(duì)較高，其中54號(hào)藻株比生長(zhǎng)速率最高，達(dá)到0.4415/d；利用冷凍干燥后稱重的方法測(cè)定終生物量，59、72號(hào)藻株終生物量明顯高于其他藻株，59號(hào)藻株終生物量最大，達(dá)到167.33?g/mL；通過重量法測(cè)定總脂含量，54、109、59號(hào)藻株總脂含量相對(duì)較高，其中54號(hào)藻株總脂含量最高，達(dá)到藻細(xì)胞干重的40.42％；54、59、109號(hào)油脂產(chǎn)率明顯高于其他藻株，59號(hào)藻株油脂產(chǎn)率最大，達(dá)到46.46g/mL。綜合考慮各方面因素，5