富勒烯-四氧化三鐵納米復(fù)合物磁靶向藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的制備及應(yīng)用.pdf

1、富勒烯(C60)具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和特殊的光學(xué)性質(zhì)，在藥物轉(zhuǎn)運(yùn)和腫瘤光動力學(xué)治療方面具有潛在應(yīng)用價值，但其難溶性極大地限制了在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。本課題研究目的是對富勒烯進(jìn)行化學(xué)修飾，在其表面連接磁性四氧化三鐵納米粒(IONPs)和親水性基團(tuán)聚乙二醇2000(PEG2000)，開發(fā)出新型磁性水溶性藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體C60-IONP-PEG，并攜帶小分子光敏劑血卟啉單甲醚(HMME)，構(gòu)建一個具有良好的磁靶向能力、光療能力和核磁成像能力的多功能腫

2、瘤靶向給藥系統(tǒng)C60-IONP-PEG/HMME。
　　本課題首先構(gòu)建了基于富勒烯衍生物的藥物載體。利用Bingle環(huán)加成反應(yīng)、酯水解反應(yīng)、水熱化學(xué)鍵合反應(yīng)合成四氧化三鐵負(fù)載的富勒烯(C60-IONP-COOH)，利用聚乙二醇2000(PEG(2000)-NH2)的氨基與該富勒烯衍生物的羧基加成，制備出磁性的C60載體系統(tǒng)C60-IONP-PEG。使用傅里葉變換紅外光譜驗(yàn)證該載體系統(tǒng)制備是否成功，使用透射電子顯微鏡、激光納米粒度分

3、析儀等進(jìn)行形態(tài)表征，使用振動樣品磁測量儀來檢測磁性，使用熱重分析儀測定該系統(tǒng)中PEG的含量，使用3T核磁共振掃描儀考察該系統(tǒng)核磁成像能力。結(jié)果表明該磁性載體系統(tǒng)制備成功，C60-IONP-PEG具有高度的水溶性、明顯的超順磁性和顯著的核磁成像能力，并且具有合適的粒徑和電位，可作為優(yōu)良的磁靶向藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體。
　　在磁靶向納米制劑的制備中，以小分子光敏劑HMME為模型藥物，通過單因素實(shí)驗(yàn)考察HMME與載體材料的投料比、超聲時間、探超功

4、率等因素對制劑載藥量的影響，確定了擬構(gòu)建腫瘤靶向給藥系統(tǒng)C60-IONP-PEG/HMME的最佳處方工藝。使用透射電子顯微鏡、激光納米粒度分析儀和紫外全波長掃描儀對該系統(tǒng)進(jìn)行表征，結(jié)果表明C60-IONP-PEG能夠高效負(fù)載HMME(載藥率～125.3％)，構(gòu)建的給藥系統(tǒng)具有良好的穩(wěn)定性和大小均一的粒徑，能夠緩釋藥物，可持續(xù)釋放藥物達(dá)120小時。
　　在體外抗腫瘤活性評價中，選用鼠源黑色素瘤(B16-F10)細(xì)胞作為研究對象，對H

5、MME和C60協(xié)同增強(qiáng)光動力學(xué)治療腫瘤的作用進(jìn)行了研究，結(jié)果表明空白載體C60-IONP-PEG對B16-F10細(xì)胞無明顯毒性，但在532nm激光照射下能夠高效產(chǎn)生活性氧，可作為光敏劑應(yīng)用于光動力學(xué)治療中。此外，532nm激光照射后，C60-IONP-PEG/HMME體系中的C60和HMME均高效產(chǎn)生活性氧，協(xié)同增強(qiáng)光療作用，共同殺傷腫瘤細(xì)胞，且具有濃度和光照強(qiáng)度依賴性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明C60-IONP-PEG/HMME具有良好的磁靶向性

6、，對磁場區(qū)域腫瘤細(xì)胞抑制增殖作用強(qiáng)。細(xì)胞內(nèi)的T2場核磁信號強(qiáng)度隨C60-IONP-PEG濃度的增加而減弱，其核磁成像的圖像呈現(xiàn)明顯的黑化效應(yīng)。
　　在體內(nèi)光療活性評價中，以接種B16-F10細(xì)胞的C57小鼠為模型動物，分別考察了C60-IONP-PEG/HMME、C60-IONP-PEG、HMME在光照和不光照條件下對小鼠黑色素瘤抑制作用，結(jié)果表明C60-IONP-PEG/HMME在磁場作用下可滯留于腫瘤部位，532nm激光照射后