低氧訓(xùn)練對大鼠腎組織細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的影響.pdf

1、目的：通過采用不同持續(xù)時(shí)間低氧后訓(xùn)練的大鼠低氧訓(xùn)練模型，研究低氧、訓(xùn)練以及低氧訓(xùn)練對大鼠腎組織細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的影響。 方法：60只SD大鼠按體重隨機(jī)分為6組，每組10只，即：對照組(A)、低氧8h組(B)、低氧12h組(C)、常氧訓(xùn)練組(D)、低氧8h訓(xùn)練組(E)和低氧12h訓(xùn)練組(F)。D、E、F組大鼠每天在坡度為0的動(dòng)物跑臺上以25m/min的速度訓(xùn)練1h。訓(xùn)練完后，將B、E組和C、F組依次放入氧濃度為12.5％(相當(dāng)于海

2、拔4000m)的低氧艙內(nèi)8h和12h。實(shí)驗(yàn)期為4wk，5d/wk。最后一次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24小時(shí)，大鼠均實(shí)施速眠新II腹腔麻醉，其理想后斷尾取全血(檢測RBC、HB、HCT值)后斷頭處死，取腎髓質(zhì)外皮質(zhì)部組織制備腎組織石蠟切片，HE染色檢測腎組織細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；免疫組化法檢測大鼠腎組織細(xì)胞HIF-1a、B細(xì)胞淋巴瘤／白血病癌基因-2(B cell lymphoma/leukemia 2，Bcl-2)、Bax(Bcl-2 associate

3、d x，Bax)因子、EPO的蛋白表達(dá)以及TUNEL標(biāo)記法在光鏡下觀察腎組織凋亡細(xì)胞核數(shù)目。 結(jié)果： 1．RBC、HB、HCT三個(gè)指標(biāo)的結(jié)果顯示：B組與E組比較均具有顯著性差異(P<0.05)；A組和D組比較亦均具有顯著性差異(P<0.05)。 2．腎組織切片進(jìn)行HE染色顯示：A組和B組大鼠腎組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，腎小管上皮細(xì)胞未見特殊改變；C組腎小管輕度腫脹，部分刷狀緣脫落，管腔內(nèi)偶可見脫落的細(xì)胞；D腎小管擴(kuò)張，細(xì)

4、胞扁平，輕度濁腫，刷狀緣脫落，腎小球輕度淤血；E組較D組病變明顯減輕，腎小管變性范圍和程度均明顯小于和輕于D組，胞核基本正常，腎小管輕度腫脹；F組腎小管上皮細(xì)胞水腫樣變性，以近曲小管為重，表現(xiàn)為腎小管管腔擴(kuò)張，管內(nèi)可見管形和脫落細(xì)胞；上皮細(xì)胞核染色質(zhì)邊集，胞漿空泡樣變性。 3．TUNEL染色切片統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示：E組和F組、C組與F組比較，具有顯著性差異(P<0.05)；A組與D組比較，具有顯著性差異(P<0.05)。

5、 4．免疫組化染色切片觀察大鼠腎組織HIF-1a的蛋白表達(dá)顯示：將實(shí)驗(yàn)各組腎組織樣本的石蠟切片進(jìn)行免疫組化染色，在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)：HIF-1a免疫組織化學(xué)陽性物質(zhì)定位于細(xì)胞核內(nèi)，呈彌散或顆粒狀或二者混合。呈強(qiáng)染性的腎組織細(xì)胞核中可見豐富陽性反應(yīng)顆粒，細(xì)胞核周圍的胞漿內(nèi)亦有陽性表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示： B組、C組分別與A組比較，均具有顯著性差異(P<0.05)；E組和F組比較具有顯著性差異(P<0.05)；A組和D組比較，具有顯著性差

6、異(P<0.05)。 5．免疫組化染色切片觀察大鼠腎組織Bcl-2、Bax和EPO的表達(dá)顯示，Bcl-2、Bax和EPO免疫組織化學(xué)陽性物質(zhì)定位于胞漿內(nèi)，偶見胞膜(或)核膜，細(xì)胞核被蘇木素復(fù)染成藍(lán)色。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：A組、B組、C組之間Bcl-2、Bax的表達(dá)均具有顯著性差異(P<0.05)；E組與F組、C組與F組比較之間比較，具有顯著性差異(P<0.05)；A組和D組比較具有顯著性差異(P<0.05)。EPO的表達(dá)結(jié)果顯示：EP

7、O結(jié)果顯示：B組和C組分別與A組比較，B組與A組有顯著性差異(P<0.05)。 6．大鼠腎組織細(xì)胞凋亡與Bax、Bax/Bcl-2比值的相關(guān)性以及HIF-1a與Bax表達(dá)的相關(guān)性顯示：大鼠腎組織細(xì)胞凋亡與Bax、Bax/Bcl-2比值之間存在正相關(guān)(P<0.05)；腎組織細(xì)胞HIF-1a的蛋白表達(dá)與Bax之間存在正相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論： 1．合適的低氧刺激使SD大鼠有氧代謝能力提高。 2．低氧訓(xùn)練