雙酚A(BPA)對(duì)斑馬魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育毒性的研究.pdf

1、雙酚A(BPA)在工業(yè)上被用來(lái)合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹(shù)脂等材料，且60年代以來(lái)就被用于制造塑料（奶）瓶、幼兒用的吸口杯、食品和飲料（奶粉）罐內(nèi)側(cè)涂層。BPA無(wú)處不在，從礦泉水瓶、醫(yī)療器械到及食品包裝的內(nèi)里，都有它的身影。每年，全世界生產(chǎn)2700萬(wàn)噸含有BPA的塑料。因此，BPA廣泛存在于我們的生活當(dāng)中，在很多環(huán)境媒介（水體、塵埃等）以及人體樣本（母乳、血清等）中都被檢測(cè)到不同濃度的BPA。BPA可能導(dǎo)致內(nèi)分泌失調(diào)，威脅著胎兒和兒童的

2、健康。癌癥和新陳代謝紊亂導(dǎo)致的肥胖也被認(rèn)為與BPA有關(guān)。另外，歐盟認(rèn)為含雙酚A奶瓶可能會(huì)誘發(fā)性早熟。因此，BPA在公共健康領(lǐng)域引起了大家廣泛的關(guān)注。盡管關(guān)于BPA毒理學(xué)研究非常的廣泛，但是在水生生物中的研究卻是相對(duì)較少，更不用說(shuō)用顯微注射的方法模擬環(huán)境中的濃度來(lái)研究其對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的影響。
　　 本文以斑馬魚(yú)為模式生物，用顯微注射的方法將不同濃度的BPA注射到斑馬魚(yú)胚胎中，同時(shí)加一組水體暴毒，研究其對(duì)斑馬魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育毒性的研究，包括

3、神經(jīng)毒性和生殖毒性。顯微注射到胚胎中的BPA終濃度為0ng/ml、0.4ng/ml、2ng/ml、10ng/ml、50ng/ml，水體暴毒的BPA濃度為1nM。神經(jīng)毒性主要研究F0、F1代120hpf光條件下和光暗刺激條件下的運(yùn)動(dòng)速度，F(xiàn)1代包括繼續(xù)顯微注射、水體暴毒和不做處理的實(shí)驗(yàn)。神經(jīng)毒性還研究了80dpf、120dpf的記憶實(shí)驗(yàn)。生殖毒性指標(biāo)包括21dpf、35dpf、42dpf、150dpf體長(zhǎng)、體重、生長(zhǎng)適應(yīng)因子，150dpf

4、的性別比例、精巢重量、精子總數(shù)和精子密度、精子總活力、活躍精子活力、精子運(yùn)動(dòng)軌跡、產(chǎn)卵能力，子一代受精率、孵化率、畸形率、死亡率，150dpf性腺石蠟切片。
　　 研究結(jié)果表明，F(xiàn)0顯微注射和水體暴毒120hpf光照條件下和光暗刺激條件下的運(yùn)動(dòng)速度呈上升的趨勢(shì)。而F1顯微注射和水體暴毒120hpf光照條件下和光暗刺激條件下的運(yùn)動(dòng)速度呈下降的趨勢(shì)。F0顯微注射、水體暴毒80dpf記憶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示斑馬魚(yú)到達(dá)食物端的時(shí)間變化不一。隨著

5、實(shí)驗(yàn)次數(shù)的增加，整體的時(shí)間都呈下降的趨勢(shì)。從整體來(lái)看，處理組的記憶能力明顯受到了影響，記憶能力不如對(duì)照組，對(duì)照組在第三天就達(dá)到了最佳的記憶能力，而處理組都要到第五天后才達(dá)到最佳的記憶能力。F0顯微注射、水體暴毒150dpf記憶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示7天以前處理組到達(dá)食物端的時(shí)間都少于對(duì)照組，這可能受到BPA的影響，處理組在80dpf記憶實(shí)驗(yàn)的記憶能力還有部分存在它們的腦中。而在7天后，對(duì)照組到達(dá)食物端的時(shí)間開(kāi)始低于部分處理組。21dpf、35dp

6、f、42dpf的顯微注射的處理組體長(zhǎng)、體重整體呈上升的趨勢(shì)，水體暴毒呈下降的趨勢(shì)。生長(zhǎng)適應(yīng)因子在21dpf沒(méi)有大的變化，35dpf、42dpf呈上升的趨勢(shì)。150dpf的體長(zhǎng)體重和生長(zhǎng)適應(yīng)因子的變化不統(tǒng)一，有上升的也有下降的。150dpf性別分化的結(jié)果與預(yù)期相反，整體有雄性化的趨勢(shì)，水體暴毒組最明顯，這可能與BPA的濃度有關(guān)，因?yàn)橛形墨I(xiàn)報(bào)道過(guò)BPA在低濃度時(shí)會(huì)表現(xiàn)一定的雄性化。精巢重量從0.4ng/ml、2ng/ml、10ng/ml、5

7、0ng/ml、到1nM呈現(xiàn)上升、下降、再上升的趨勢(shì)。精子總數(shù)和精子密度的結(jié)果表明顯微注射處理組基本呈上升的趨勢(shì)，水體暴毒呈下降的趨勢(shì)。精子總活力和活躍精子活力的結(jié)果顯示只有1nM顯著降低，其它顯微注射組沒(méi)有明顯的變化。精子運(yùn)動(dòng)軌跡沒(méi)有明顯的變化趨勢(shì)。產(chǎn)卵量的結(jié)果表明顯微注射組呈上升的趨勢(shì)，水體暴毒呈下降的趨勢(shì)，但不明顯。在子一代受精率方面，顯微注射組呈上升的趨勢(shì)，水體暴毒呈下降的趨勢(shì);孵化率(48hpf、72hpf)方面沒(méi)有明顯的變化。