表面等離子體共振譜儀用于糖蛋白的檢測(cè)研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文表面等離子體共振譜儀用于糖蛋白的檢測(cè)研究StudyontheDetectionofGlycoproteinbySurfacePlasmonResonanceSpectrometer學(xué)號(hào)：21302053完成日期：至Q!魚生墨旦大連理工大學(xué)DalianUniversityofTechnology大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要表面等離子體共振(SurfacePlasmonResonance，SPR)傳感技術(shù)具有能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)動(dòng)態(tài)過(guò)

2、程，分析樣品無(wú)需標(biāo)記、無(wú)需純化，反應(yīng)靈敏度高，尤其是在研究動(dòng)力學(xué)常數(shù)方面的突出優(yōu)點(diǎn)，成為近幾年的研究熱點(diǎn)，目前已經(jīng)被應(yīng)用到生化分析、醫(yī)學(xué)檢測(cè)、環(huán)境保護(hù)及食品安全等領(lǐng)域。本文介紹了一種表面等離子體共振生化分析儀，采用角度掃描與強(qiáng)度調(diào)制相結(jié)合的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)糖蛋白的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。在理論模擬部分，先介紹了表面等離子體共振的原理；再通過(guò)Matlab模擬說(shuō)明角度掃描與強(qiáng)度調(diào)制結(jié)合方法的可用性，又對(duì)共振角左側(cè)的三個(gè)不同工作點(diǎn)進(jìn)行了比較，得出最佳工作點(diǎn)為共

3、振角與斜率最大值的中點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)部分，也驗(yàn)證了模擬的結(jié)論，并進(jìn)行了糖蛋白的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)?！谙到y(tǒng)標(biāo)定實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)比較斜率最大值和共振角與斜率最大值的中點(diǎn)作為工作點(diǎn)的線性范圍、靈敏度和分辨率的差別，得出中點(diǎn)為最佳工作點(diǎn)，驗(yàn)證了模擬的結(jié)論，也確定了該系統(tǒng)的線性范圍為13256136997，靈敏度為1767RIU～，折射率分辨率為124810一RIU。在糖蛋白的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，對(duì)不同pH值的再生液進(jìn)行了對(duì)比，pH_3的再生能力達(dá)到97％，選擇該pH值的

4、溶液作為再生液；對(duì)同一濃度的糖蛋白進(jìn)行了5次測(cè)量，得出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為383‰通過(guò)非糖蛋白與糖蛋白的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)方法可以對(duì)糖蛋白進(jìn)行特異性檢測(cè)；最后檢測(cè)了濃度在0011mg／mL的糖蛋白R(shí)NaseB，進(jìn)行了線性擬合和多項(xiàng)式擬合，通過(guò)殘差分析和相關(guān)系數(shù)的比較得出RNaseB的濃度與消除光源波動(dòng)后的信號(hào)值變化的關(guān)系更符合多項(xiàng)式擬合，因此以多項(xiàng)式擬合曲線作為其標(biāo)準(zhǔn)曲線；并進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)常數(shù)的分析，得出結(jié)合平衡常數(shù)K=5787mL