基于四苯基乙烯的聚集誘導(dǎo)發(fā)光高分子的合成及其在基因遞送體系中的應(yīng)用.pdf

1、近年來，陽離子高分子由于具有合成簡單、價(jià)格便宜、生物相容性好、生物可降解、無毒無免疫原性、水溶性好等性質(zhì)，在基因遞送體系中得到了廣泛的應(yīng)用。本課題中，首先合成了兩種不同種類的高分子：一種是通過原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）方法得到的線性聚甲基丙烯酸縮水甘油酯，并對(duì)其進(jìn)行了連續(xù)的環(huán)糊精、乙二胺和胍基化修飾；另一種是對(duì)枝狀的聚乙烯亞胺進(jìn)行環(huán)糊精修飾，并通過核磁共振氫譜和傅里葉紅外光譜驗(yàn)證了兩種高分子的成功合成。在電荷作用下，分別與pDNA形

2、成了復(fù)合體，瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)表明兩種高分子都能夠充分的保護(hù)pDNA，掃描顯微鏡結(jié)果表明復(fù)合體都是均一的球形納米粒子，并且都表現(xiàn)出了較低的細(xì)胞毒性和較高的轉(zhuǎn)染效率。此外，胍基化的修飾能夠有效提高復(fù)合體的溶酶體逃逸率和基因轉(zhuǎn)染效率。
　　為達(dá)到追蹤基因釋放過程的目的，將具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光（AIE）性質(zhì)的分子引入到了基因遞送體系中。首先合成了具有順式結(jié)構(gòu)的雙硼酸基團(tuán)修飾的四苯基乙烯（TPEDB），然后將其分別與兩種高分子作用，通過硼酸酯

3、鍵的形成得到了兩種聚集誘導(dǎo)發(fā)光高分子。其次，分別對(duì)兩種 AIE高分子與 pDNA作用形成的復(fù)合體進(jìn)行了表征，它們都能夠很好地保護(hù)pDNA，并形成了更小的納米粒子，并且能夠提高納米粒子的穩(wěn)定性。激光掃描共聚焦實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：AIE高分子具有更好的基因遞送能力，甚至能夠?qū)DNA運(yùn)送至細(xì)胞核中。通過將熒光染料NBD標(biāo)記的DNA和AIE高分子構(gòu)建成熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系，在雙光子激光掃描共聚焦下，能夠更好地追蹤pDNA的釋放過程及載體、pDNA的