鐘基因Per1、Per2及腫瘤相關(guān)基因在金黃地鼠頰癌不同階段晝夜節(jié)律改變.pdf

1、目的:
　　探討鐘基因Per1、Per2和腫瘤相關(guān)鐘控基因VEGF、Ki67、c-Myc和 P53在金黃地鼠頰粘膜癌變不同階段的晝夜節(jié)律變化規(guī)律以及與癌變發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　方法：
　　90只金黃地鼠置于12 h光照和12 h黑暗交替環(huán)境中飼養(yǎng)，用二甲基苯并蒽涂抹頰粘膜建立金黃地鼠頰癌模型，分別在涂抹二甲基苯并蒽前、6周和14周后的24h內(nèi)的6個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物，獲取正常頰粘膜、癌前病變和癌癥3個(gè)癌變階段各晝夜6個(gè)

2、不同時(shí)間的組織。行常規(guī)HE染色檢查；用Real time RT-PCR檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)組織中Per1、Per2、VEGF、Ki67、c-Myc和P53 mRNA的表達(dá)；行余弦分析，以中值、振幅和峰值位相時(shí)為指標(biāo)反應(yīng)各基因表達(dá)的晝夜節(jié)律特征。
　　結(jié)果：
　　Per1、Per2、VEGF、P53和c-Myc mRNA分別在癌變3個(gè)階段的表達(dá)均具有晝夜節(jié)律（P<0.05），Ki67 mRNA在正常和癌前病變階段中的表達(dá)具有晝夜節(jié)律（

3、P<0.05），但在癌癥階段變現(xiàn)為晝夜節(jié)律紊亂(P>0.05)；Per1、Per2和P53 mRNA表達(dá)的中值隨作癌癥的發(fā)展而顯著降低（P<0.05），VEGF、c-Myc和Ki67 mRNA表達(dá)的中值隨作癌癥的發(fā)展而顯著上升（P<0.05）；Per1、P53 mRNA的振幅隨作癌癥的發(fā)展顯著降低（P<0.05），Per2、VEGF、Ki67和c-Myc mRNA的振幅在癌前病變和癌癥階段均分別顯著高于正常組（P<0.05），但在癌癥和

4、癌前病變階段之間無(wú)顯著改變(P>0.05)；在癌前病變階段Per1、Per2、VEGF和 c-Myc mRNA的峰值位相時(shí)較正常階段分別提前9.66h、2.94 h、3.72h和3.86 h，而Ki67和 P53 mRNA峰值位相時(shí)分別滯后18.28 h和3.4 h；在癌癥階段VEGF和c-Myc mRNA的峰值位相時(shí)較正常階段分別提前8.89 h和滯后16.15h，而 Per1、Per2和P53 mRNA無(wú)明顯變化。
　　結(jié)論：